馬 斐，李 鑫，張佳慧，張艷紅，姜 銳

（德州市食品藥品檢驗檢測中心，山東德州 253000）

摘 要：本實(shí)驗采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定芝麻油中乙基麥芽酚并用Q-trap進(jìn)行全掃描確認。樣品以甲醇為提取溶劑，經(jīng)渦旋混勻、低溫高速離心、微孔濾膜過(guò)濾后進(jìn)行HPLC-MS/MS分析。采用Agilent Poroshell 120 EC-C18(100 mm×

3.0 mm，2.7 μm)柱進(jìn)行分離，梯度洗脫，流速0.3 mL/min，進(jìn)樣量2μL。質(zhì)譜分析采用電噴霧離子源，多反應監測（MRM）+EPI模式，外標法定量。結果表明，芝麻油中的乙基麥芽酚有本底干擾，含量低于國家標準要求檢出限。

關(guān)鍵詞：乙基麥芽酚；Q-trap；液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；芝麻油；香料

乙基麥芽酚是一種安全、可靠、用量少、效果顯著(zhù)的食品添加劑。作為一種香味改良劑、增香劑，應用越來(lái)越廣泛，是煙草、食品、飲料、香精、果酒、日用化妝品等良好的香味增效劑，對食品的香味改善和增強具有顯著(zhù)效果，對甜食起著(zhù)增甜作用，且能延長(cháng)食品儲存期。然而，乙基麥芽酚過(guò)量食用對人肝臟有影響，骨骼和關(guān)節提前脆變癌變等疾病。嚴重的還可能導致頭痛、惡心、嘔吐、呼吸困難，甚至能夠損傷肝、腎，對人體有較大的危害。

歐洲理事會(huì )將乙基麥芽酚列入可用于食品中而對人體健康無(wú)害的人造食用香料表中，其最高用量為10 mg/kg，ADI值為2 mg/kg[1]。中國根據《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》（GB 2760—2014）食品添加劑使用衛生標準，批準為允許使用的食品香料。但不允許加入植物油中作為摻假或增香的手段使用[2]。

1 材料與方法

1.1 儀器、試劑與材料

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀SCIEX 5500 Qtrap，SCIEX公司；精密電子天平XSE105，瑞士Mettler-Toledo公司；試管渦旋振蕩器，德國海道爾夫（Heidolph）公司；H1850R臺式高速冷凍離心機，長(cháng)沙高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區湘儀離心機儀器有限公司；13 mm×0.22 μm有機濾膜，上海安譜實(shí)驗室科技股份有限公司。

乙基麥芽酚標準品（100 mg，純度99.90%，批號：71032），北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司；甲醇（色譜純），德國默克。

1.2 標準品及樣品溶液制備

1.2.1 標準品溶液

準確稱(chēng)取乙基麥芽酚標準品106.3mg，用甲醇溶解并定容至100 mL，此溶液濃度為1.063 mg/mL。吸取濃度為

1.063 mg/mL的溶液1.00 mL至100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，溶液濃度為10.63 μg/mL[3]。

分別吸取濃度為10.63 μg/mL的溶液1.00 mL、2.00 mL、

3.00 mL、5.00 mL至10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，溶液濃度分別為1.063 μg/mL、2.126 μg/mL、

3.189 μg/mL和5.315 μg/mL。

準確稱(chēng)取與試樣基質(zhì)相應的陰性試樣10 g，分別加入上述5個(gè)濃度1.063 μg/mL、2.126 μg/mL、3.189 μg/mL、

5.315 μg/mL和10.63 μg/mL溶液0.20 mL，與試樣同時(shí)進(jìn)行處理，制備成質(zhì)量濃度為10.63 ng/mL、21.26 ng/mL、

31.89 ng/mL、53.15 ng/mL和106.3 ng/mL的基質(zhì)標準工作溶液。

1.2.2 樣品處理

準確稱(chēng)取10 g試樣置于50 mL聚丙烯離心管中，用移液器準確加入10 mL甲醇，渦旋振搖2 min，4 ℃條件下離心10 min，將上清液移入20 mL具塞刻度試管中，下層油液再用10 mL甲醇重復提取一次，合并上清液，用甲醇定容至20 mL，經(jīng)微孔濾膜（0.22 µm，有機相）過(guò)濾，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent Poroshell 120 EC-C18（100 mm×3.0 mm，2.7 μm）；柱溫：40℃；流動(dòng)相：A-0.1%甲酸水溶液，B-甲醇；梯度洗脫程序：0～1.5 min、50%B，1.5～3 min、50%～90%B，3～5 min、90%B，5～6 min、50% B；流速：0.3 mL/min；進(jìn)樣體積：2µL。

1.4 質(zhì)譜條件

采用ESI正離子模式，多反應監測（MRM）+EPI監測方式；離子噴霧電壓：5 500 V；離子源溫度：500 ℃；霧化器壓力：50 psi；輔助氣壓力：50 psi；氣簾氣壓力：35 psi；EPI參數：掃描范圍50～150 Da；阱集時(shí)間5.00 msec；碰撞能量30 eV（±15）。定性離子對、定量離子對、去簇電壓和碰撞能見(jiàn)表1。

 

2 結果與分析

2.1 樣品測定

采用該方法對30余批芝麻油進(jìn)行檢測，樣品均有本底值，見(jiàn)圖1，并用Q-trap進(jìn)行了全掃描圖譜的確認，樣品與標準品中乙基麥芽酚峰的二級質(zhì)譜圖對比結果基本一致，匹配得分在95.0，見(jiàn)圖2和圖3。根據國家補充檢驗方法BJS 201708中規定檢出限為25.0 μg/kg，測得不合格樣品1批，含量為64.3 μg/kg。其余含量均低于方法檢出限。

 

2.2 芝麻油中含有乙基麥芽酚的結果分析

采用該方法同時(shí)對大豆油進(jìn)行檢測，樣品完全不含有乙基麥芽酚[4]，無(wú)本底干擾。說(shuō)明芝麻油的原料本身會(huì )有或者加工工藝中可能產(chǎn)生乙基麥芽酚，但是正常值都會(huì )小于國家規定的方法檢出限。本實(shí)驗同時(shí)考察了不同原料的本底含量值，發(fā)現以進(jìn)口芝麻和國產(chǎn)芝麻為原料的芝麻油中乙基麥芽酚含量值并無(wú)差別。此次試驗的樣品均為小磨芝麻香油，均采用的是水代法工藝，對其他工藝沒(méi)有考察。與其他研究者討論，可能和工藝過(guò)程中的炒制時(shí)間、加熱溫度等有關(guān)系，會(huì )導致乙基麥芽酚本底含量的不同，有待進(jìn)一步實(shí)驗[5]。

3 結論

本實(shí)驗采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定芝麻油中乙基麥芽酚并用Q-trap進(jìn)行全掃描確認。對30余批純芝麻油進(jìn)行了檢測，并證實(shí)芝麻油中確實(shí)含有乙基麥芽酚本底值，并非其他干擾物質(zhì)。本底含量值與原料關(guān)系不大，可能和工藝過(guò)程有關(guān)，有待進(jìn)一步實(shí)驗確證。

參考文獻

[1]周惠健,劉佩,劉嘉瓊,等.食品中乙基麥芽酚檢測方法的研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2021,12(8):3266-3272.

[2]胡啟立,劉國強,程江闖,等.食用植物油中乙基麥芽酚測定干擾未知物分析[J].食品工業(yè),2021,42(2):291-294.

[3]國家市場(chǎng)監督管理總局.總局關(guān)于發(fā)布《食用植物油中乙基麥芽酚的測定》食品補充檢驗方法的公告(2017年第97號)[EB/OL].(2017-08-17)[2021-06-06].http://news.foodmate.net/2017/08/440795.html.

[4]羅小寶,孫藝,周芳梅,等.LC-MS/MS法測定食用植物油中乙基麥芽酚的不確定度評定[J].現代食品,2021(9):188-194.

[5]林正鋒,李實(shí)飛,黃杰英,等.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定乳制品中四種常用香料[J/OL].食品工業(yè)科技:1-11[2021-06-06].https://doi.org/10.13386/j.issn1002-0306.2021010170.