食品中脫氫乙酸的檢測方法分析

次曉娟

（豐鎮市檢驗檢測中心，內蒙古烏蘭察布 012199）

作者簡(jiǎn)介：次曉娟（1991—），女，漢族，山西大同人，本科，助理工程師。研究方向：食品化學(xué)。

摘 要：脫氫乙酸因具有高效的抗菌和低毒的特性，在食品生產(chǎn)中常被作為防腐劑使用。不同食品基質(zhì)不同，在檢測中需要用不同的前處理方法和儀器進(jìn)行定性定量分析。本文主要分析了食品中脫氫乙酸的檢測方法。

關(guān)鍵詞：脫氫乙酸；氣相色譜；液相色譜

脫氫乙酸是一種新型的化學(xué)防腐劑，自20世紀中葉發(fā)現它具有抗菌性以來(lái)，已被許多國家作為防腐劑，屬廣譜類(lèi)防腐劑，安全性和穩定性高，抑制酵母菌、霉菌和細菌的繁殖作用極強。戴有金[1]利用脫氫乙酸鈉對大小鼠進(jìn)行經(jīng)口急性毒性實(shí)驗，得出脫氫乙酸若使用不當，會(huì )對人的身體健康產(chǎn)生威脅的結論，WHO將脫氫乙酸列入低毒級別進(jìn)行管控。我國規定脫氫乙酸鈉在腌漬蔬菜和淀粉制品中限量是

1.0 g/kg，黃油、糕點(diǎn)、肉制品等其他幾類(lèi)產(chǎn)品中規定添加量不得超過(guò)0.3～0.5 g/kg[2]。檢測脫氫乙酸的含量要求要準確且高效，檢測機構常將氣相色譜法和液相色譜法作為常用方法使用，再以其他方法作為輔助檢測方法。

1 氣相色譜法

氣相色譜法為GB 5009.121—2016[3]的第一法，基本原理為固體（半固體）樣品，沉降蛋白，經(jīng)脫脂酸化后，用乙酸乙酯提取。如果蔬汁、果蔬漿樣品經(jīng)酸化后，采用乙酸乙酯提取，FID檢測器測定，以色譜峰的保留時(shí)間定性，外標法定量，但該方法中推薦的檢測條件，并不是最優(yōu)條件。

在樣品的前處理環(huán)節上，劉煒等[4]發(fā)現一般生產(chǎn)時(shí)添加的防腐劑是脫氫乙酸鈉，加鹽酸酸化后，形成脫氫乙酸，極性減弱，較易被弱極性的乙醚提取，加入酸性氯化鈉后，由于鹽析作用，會(huì )使乙醚層中的微量水盡可能釋放出來(lái)，促進(jìn)分層。經(jīng)過(guò)兩次25 mL乙醚萃取，脫氫乙酸能完全萃取，該方法的回收率在87.6%～97.9%，RSD在0.8%～3.7%，該方法結果準確可靠，重現性良好。

在色譜條件上，朱自德等[5]將GB 5009.121—2016中建議的極性毛細管柱換成弱極性毛細管柱DB-5，最佳升溫程序為初始溫度80 ℃，以12 ℃/min速率升至210 ℃，再以25 ℃/min速率升至240 ℃，保持4 min，適宜采用分流比為10︰1。中高低3個(gè)梯度的加標回收率均在90%～100%，該方法測得結果準確可靠。

以上研究針對國標中氣相色譜法檢測的不足之處進(jìn)行方法研究和改進(jìn)，通過(guò)優(yōu)化色譜條件和前處理方法，探索出簡(jiǎn)便、快捷和高效，且使用樣品基質(zhì)范圍較廣的檢測方法。

2 液相色譜法

液相色譜法為GB 5009.121—2016的第二法，基本原理是試樣中的脫氫乙酸經(jīng)氫氧化鈉溶液提取后，再進(jìn)行脫脂、脫蛋白等處理，用PDA檢測器測定，依據色譜峰的保留時(shí)間定性，外標法定量。

在樣品的前處理環(huán)節上，富含蛋白質(zhì)的樣品在前處理過(guò)程中很難通過(guò)濾膜，脫氫乙酸難溶解于水，用常規方法，將亞鐵氰化鉀和乙酸鋅加入后，雜質(zhì)和脫氫乙酸均被沉淀，測定結果準確性被降低。鄧迎春[6]等先用硫酸鋅（0.4 mol/L）和氫氧化鈉（0.5 mol/L）將溶液調為堿性，將脫氫乙酸變?yōu)殁c鹽，使之更易溶于水，再分別用甲醇和硫酸鋅及氫氧化鈉完成蛋白沉淀和進(jìn)一步去除蛋白的任務(wù)，檢測準確性有所提高。

吳寧寧[7]等發(fā)現，按照GB 5009.121—2016提供色液相條件進(jìn)行檢測，色譜峰拖尾嚴重。原因在于脫氫乙酸的羰基結構易與C18柱中的硅羥基結構發(fā)生反應，形成氫鍵，可通過(guò)改變流動(dòng)相的pH來(lái)確定合適的流動(dòng)相及其比例。以甲醇+0.1%磷酸水溶液（55+45）為流動(dòng)相的色譜條件下進(jìn)行測定發(fā)現，回收率在90%以上，線(xiàn)性相關(guān)系數、重復性等均良好，且色譜峰拖尾明顯改善。

以上研究在國標中液相色譜法的基礎上對樣品的前處理及色譜條件進(jìn)行了優(yōu)化，將前處理過(guò)程簡(jiǎn)單化，色譜條件中對流動(dòng)相進(jìn)行了調整，優(yōu)化后的檢測方法更加快捷、準確，可在某些食品檢測系統中推廣應用。

3 其他檢測方法

除以上兩種色譜檢測方法外，常用的還有利用紫外分光光度法測定脫氫乙酸的含量。陳丹萍[8]將樣品中脫氫乙酸在酸性條件下經(jīng)水蒸氣和有機溶劑萃取后，用紫外分光光度計在308 nm波長(cháng)處測定吸光度。結果顯示脫氫乙酸加標回收率為94.1%～103.7%，精密度在0.4%～4.7%。趙舒景[9]采用293 nm為檢測波長(cháng)，將樣品加蛋白質(zhì)沉淀劑硫酸鋅溶液（0.42 mol/L）和氫氧化鈉溶液（20 g/L）后離心用上清液上機檢測，這種前處理方法簡(jiǎn)單、省時(shí)，檢測脫氫乙酸加標回收率為94.9%～99.0%。肖樹(shù)秀[10]同樣采用293 nm為檢測波長(cháng)，經(jīng)去蛋白、離心后，取上清液上機檢測，實(shí)驗回收率為97.2%。

該方法操作簡(jiǎn)單，儀器設備投入較小，檢測成本低，適用于簡(jiǎn)單基質(zhì)的樣品。隨著(zhù)人們物質(zhì)生活的提升，送檢的樣品基質(zhì)愈發(fā)復雜，存在雜質(zhì)會(huì )影響吸光度，進(jìn)而對檢測結果的準確性和重復性存在較大影響。紫外分光光度法的適用范圍有限，適用于基層檢驗檢測機構，可作為國標方法的補充。

4 結語(yǔ)

目前，脫氫乙酸的檢測方法以氣相色譜法和液相色譜法為主，面對復雜的送檢基質(zhì)，可通過(guò)改進(jìn)前處理方法，優(yōu)化檢測條件等措施，建立適應于市場(chǎng)的檢測方法，為食品安全監管提供技術(shù)支持。

參考文獻

[1]戴有金,夏亮.脫氫乙酸鈉大小鼠急性毒性實(shí)驗[J].中國畜禽種業(yè),2019,(12):52.

[2]中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會(huì ).食品安全國家標準食品添加劑使用標準:GB 2760—2014[S].北京.中國標準出版社,2014.

[3]食品安全國家標準食品中脫氫乙酸的測定:GB5009.121—

2016[S].北京:中國標準出版社,2016.

[4]劉煒,楊曉鳳,雷紹榮.氣相色譜法同時(shí)測定醬腌菜中山梨酸、脫氫乙酸、苯甲酸的含量[J].山西農業(yè)科學(xué),2016,44(10):1484-1486,1496.

[5]朱自德,方林明,陳輝德,等.氣相色譜法測定面包 糕點(diǎn)和肉制品中脫氫乙酸[J].安徽農業(yè)科學(xué),2020,48(1):213-215.

[6]鄧迎春,徐曉楠,郭旭光,等.高效液相色譜法同時(shí)測定食品中安賽蜜、苯甲酸(鈉)、山梨酸(鉀)、脫氫乙酸(鈉)和糖精鈉[J].中國衛生檢驗雜志,2020,30(8):918-921.

[7]吳寧寧,高運通.高效液相色譜法測定食品中脫氫乙酸含量的方法優(yōu)化[J].產(chǎn)業(yè)與科技論壇,2019,18(11):68-69.

[8]陳丹萍,褚慶華,楊富春,等.紫外分光光度法快速測定調味品中脫氫乙酸含量[J].中國食品添加劑,2015(4):195-198.

[9]趙舒景,常曉歌,劉宏坤,等.紫外分光光度法測定火腿腸中脫氫乙酸鈉[J].河南預防醫學(xué)雜志,2007,18.(4):276.

[10]肖樹(shù)秀.食品中脫氫乙酸的檢測方法[J].煤炭與化工,2017,40(1):149-151.