氯霉素是一種高效廣譜的抗生素，可用于各種動(dòng)物傳染性疾病的防治，但它的副作用很大。1999年9月13日中華人民共和國農業(yè)部發(fā)布了《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量》的通知，規定了氯霉素在所有食品動(dòng)物的可食用組織中不得檢出。2002年3月15日，被我國農業(yè)部關(guān)于發(fā)布《食品動(dòng)物禁用的獸藥及其化合物清單》列為禁止使用的抗生素。

　　研究使用智能化食品安全一體機對樣品進(jìn)行前處理后，使用高效液相色譜儀進(jìn)行檢測。實(shí)驗方法簡(jiǎn)單易行，目標物質(zhì)回收率高。

　　試劑和材料

　　氯霉素標準品來(lái)自中國水產(chǎn)科學(xué)研究院。準確稱(chēng)量氯霉素標品10mg，用甲醇定容于100mL容量瓶中，配制成100 μg/mL的標準貯備液。

　　氯霉素前處理試劑盒，包含提取劑、固相萃取柱、洗脫劑。

　　其余試劑均為色譜純。

　　儀器和設備

　　高效液相色譜儀DIONEX U3000：配有DAD檢測器。

　　智能化食品安全一體機。

　　液相色譜條件

　　(1)色譜柱：C18柱，4.6 mm×150mm(d.i.),粒度5μm。流動(dòng)相：乙腈+1%乙酸水溶液=20+80(V/V)。流速：1.0mL/min柱溫：35℃。進(jìn)樣量 ：20μL。檢測波長(cháng)：282nm。

　　測定步驟

　　稱(chēng)取樣品1.00g，加入到智能化食品安全一體機的樣品杯中，裝入固相萃取柱，按表1設定儀器工作參數。

　　處理完成后，取下固相萃取柱，加入1mL洗脫劑洗脫，過(guò)4.5μm膜后按色譜條件檢測。

　　結果與討論

　　色譜測定

　　在上述色譜條件下，氯霉素的保留時(shí)間約為11.137min。圖1、圖2為樣品加標前后色譜圖對照。

　　繪制標準工作曲線(xiàn)

　　移取氯霉素的標準溶液，用流動(dòng)相稀釋成50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L標準工作溶液，用高效液相色譜儀測定，和空白樣液色譜對照得出標準工作曲線(xiàn)。線(xiàn)性系數0.989，y=1073.9x+5829.1。

　　樣品檢測結果計算

　　用色譜數據處理機或按式(1)計算供試樣品中氯霉素殘留量。

　　ω=ci;

　　ω-食品中氯霉素殘留量，μg/kg;

　　ci-標準曲線(xiàn)上查出試樣溶液中氯霉素標準工作溶液的濃度，μg/L。

　　統計10個(gè)以上樣品檢測數據，得出方法回收率為97.67%左右。