食品微生物檢驗方法研究

2016-09-26 16:10:26 來(lái)源: 食品安全導刊

  近些年隨著(zhù)各類(lèi)食品安全問(wèn)題相繼被報道,食品安全已經(jīng)成為社會(huì )關(guān)注熱點(diǎn)。目前危害食品安全最主要的原因依然是病原微生物的侵入。據WTO統計,全球每年約有15億人感染食源性疾病,其中70%的疾病是由病原微生物污染引起,因此,如何提高病原微生物檢驗靈敏度和準確度成為食品安全工作人員研究的熱點(diǎn)問(wèn)題。

  食品微生物是指個(gè)體微小、構造簡(jiǎn)單的低等生物。微生物的種類(lèi)非常豐富,根據細胞有無(wú)可以分為細胞型和非細胞型,根據細胞結構可以分為真核微生物和原核微生物。各國對于食品微生物檢驗項目都很多,但是各國根據各國的實(shí)際情況,在微生物檢驗項目之間存在一定區別。我國食品微生物檢驗主要包括細菌總數、大腸菌群、金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌等。

  免疫檢測技術(shù)ATP生物發(fā)光法是近些年應用廣泛的一種免疫檢測技術(shù)。其主要是利用熒光素酶基于三磷酸腺苷(ATP)、熒光素及氧氣,在存在著(zhù)鎂離子這種情況時(shí),可把化學(xué)能向光能這種形式進(jìn)行轉化,三磷腺苷基于一定的濃度范圍,其濃度與所發(fā)光的強度可呈現為線(xiàn)性關(guān)系。該方法簡(jiǎn)便、快速,不需要進(jìn)行微生物培養過(guò)程,直接將食品中的含菌量推算出來(lái),在肉內食品細菌檢測中應用廣泛。分子生物學(xué)方法PCR技術(shù) PCR技術(shù)即聚合酶鏈式反應技術(shù),其原理是通過(guò)加熱雙鏈DNA,使其裂解為單鏈DNA,然后加入引物、DNA聚合酶以及模板,降低溫度,使引物與DNA的互補序列退化,再升高溫度,促使DNA合成。反復之后就能夠獲得大量的目的性片段,通過(guò)對片段進(jìn)行測序研究就能夠判斷微生物種類(lèi)。食品微生物檢驗中,PCR方法能夠準確的檢測啤酒中啤酒酵母、水體中大腸桿菌數量。核酸探針?lè )?emsp;核酸探針?lè )捶肿与s交技術(shù),該項技術(shù)主要利用DNA分子的復性、變性以及堿基互補等特點(diǎn),同時(shí)基于同位素、生物素等標記確定探針的特異性。核酸是載有遺傳信息的生物大分子,核酸探針技術(shù)就是將核酸作為標靶,核酸能夠與具有同源性序列的核酸單鏈互補為穩定的DNA/DNA、DNA/RNA鏈,通過(guò)合成特定的核酸探針就能夠將特異的基因測定出來(lái)。該項技術(shù)非常敏感,目前已經(jīng)運用到食品微生物檢驗。

  代謝學(xué)技術(shù),電阻抗法 電阻抗法近些年已經(jīng)運用到食品微生物檢驗中,其原理是微生物在培養繁殖過(guò)程中會(huì )分解培養基中的大分子物質(zhì)為小分子帶電活性物質(zhì),例如乳酸鹽、醋酸鹽,這些小分子帶電離子能夠增加培養基的導電性,改變培養基的阻抗,通過(guò)檢測培養基的阻抗變化就能夠判斷培養基微生物種類(lèi),該方法主要用于對金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌、霉菌、酵母菌的檢測??焖倜赣|反應 快速酶觸反應是根據微生物在生長(cháng)繁殖過(guò)程中會(huì )合成某種特異的酶,選用相應的底物和指示劑就能夠判斷該培養基是否存在某類(lèi)微生物,該法主要用于快速測定某類(lèi)微生物是否存在,該方法能夠快速測定細菌總數、酵母菌、金黃色葡萄球菌、大腸菌群等。微量生化法 微量生化法主要通過(guò)商業(yè)試劑盒快速發(fā)展,其中API細菌數值鑒定系統是較為著(zhù)名的一種商業(yè)試劑盒,由法國生物-梅里埃集團生產(chǎn)。其含有20個(gè)塑料小管,管內加有反應底物的干粉和反應產(chǎn)物的顯色劑,能夠鑒定菌種的各種生理生化反應,目前該試劑盒已被國內外各相關(guān)實(shí)驗室選用,能夠鑒定700多種細菌,反應簡(jiǎn)單、快速、可靠。微生物檢測儀 常用的微生物檢測儀包括流式細胞術(shù)和電阻電導檢測器。流式細胞術(shù)基本原理是對細胞懸液進(jìn)行定量分析,由于其檢測到的熒光強度與DNA片段大小成正比,因此能夠快速鑒定細胞懸液中微生物種類(lèi)和數量。電阻電導檢測器主要是根據測定培養液中的電阻電導率來(lái)確定食品中微生物的種類(lèi)和數量,其原理是根據微生物對周?chē)蠓肿游镔|(zhì)的分解。

  食品微生物檢驗關(guān)系到全社會(huì )甚至是全人類(lèi)的生命安全,食品微生物檢驗人員應該提高自身專(zhuān)業(yè)素質(zhì),在工作過(guò)程中盡心盡責,確保工作準確無(wú)誤。

  青島市疾病預防控制中心

  曲劍英 王麗娟 王慧 郭凱

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