□ 蔡先軍 長(cháng)沙鐵路疾控中心懷化工作站

　　摘 要：通過(guò)高效液相色譜法，對添加劑進(jìn)行分離和檢測，以建立一種可以同時(shí)測定飲料中多種添加劑的檢測方法。在被測樣品經(jīng)過(guò)處理進(jìn)樣后，各組分離完全，相關(guān)系數均超過(guò)了0.999，加標回收率在96%～108%之間。這種方法方便、迅速，重現性好，工作效率高，9min內就能夠檢測出一種樣品中的這4種添加劑含量。

　　關(guān)鍵詞：液相色譜 苯甲酸 山梨酸 糖精鈉 胭脂紅

　　常用的食品添加劑有防腐劑、著(zhù)色劑、人工合成甜味劑等。目前，食品種類(lèi)越來(lái)越多，同時(shí)各類(lèi)食品也大量使用了食品添加劑，長(cháng)期的過(guò)量攝入會(huì )對人體健康產(chǎn)生不良影響，在實(shí)際的操作過(guò)程中相應的食品檢驗面對著(zhù)很大的分析任務(wù)，因此需要研究切實(shí)可行、行之有效的食品檢測方法，進(jìn)而達到對眾多樣品快速分析的目的。本文通過(guò)高效液相色譜法，分析了食品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、胭脂紅4種添加劑的色譜分離條件，并成功地將該方法用于測定飲品中的添加劑含量。

　　1 材料與方法

　　1.1 儀器與試劑

　　1.1.1 儀器

　　Shimadzu LC10_Avp液相色譜儀,色譜工作站;上海BRANSON SB2200超聲振蕩器，津騰GM_0.20隔膜真空泵，0.45μm微孔濾膜.

　　1.1.2 試劑

　　標準物質(zhì)貯備液或固體標準均來(lái)自于國家標準物質(zhì)研究中心;乙腈為色譜純，其它的試劑均為分析純;試驗用水為市售小瓶裝娃哈哈純凈水。

　　1.2 色譜條件分析

　　色譜柱：Hypersil ODS柱(5μm，125mm×4.00mm);乙腈+0.02moL/L NH4AC=3%+97%，5min時(shí)乙腈+0.02 moL/L NH4AC=15%+85%;流速：1.0mL/min;進(jìn)樣量：20μL;檢測波長(cháng)：230nm。以保留時(shí)間及吸收光譜特性進(jìn)行定性，以色譜峰高會(huì )峰面積進(jìn)行定量。

　　1.3 試樣制備

　　稱(chēng)取碳酸飲料、果汁以及茶飲料等飲品各20.0g于50mL的容量瓶中，然后加純凈水稀釋至50mL，混勻，再經(jīng)0.45μm微孔濾膜進(jìn)行過(guò)濾，濾液上機測定;對于含碳酸的飲品需要先進(jìn)行加熱，時(shí)間20min，或是通過(guò)攪拌的方法，進(jìn)而除去二氧化碳,然后用氨水(1+1)調pH值約為7。

　　2 結果與討論

　　2.1 分離條件的選擇

　　選擇Hypersil ODS柱作為分離柱，以醋酸銨—乙腈為流動(dòng)相，對流動(dòng)相中乙腈和醋酸銨溶液的比例和梯度進(jìn)行調節，進(jìn)而確立以下幾點(diǎn)分離條件：進(jìn)行分離前，乙腈和0.02moL/L醋酸銨的比例為3∶97，在進(jìn)樣后，在5min內乙腈比例以2.4%/min的速度升至15%，同時(shí)緩沖液比例降到85%，并維持至分析結束。選定流速為1.0mL/min，9min內可以完全分離4種添加劑，而且分離度都超過(guò)了1.5，表明分離情況良好。4種添加劑的分離情況，如圖1所示。

　　2.2 柱溫的選擇

　　柱溫對分離效果的影響實(shí)驗結果表明，在20℃、30℃和40℃的溫度下，在溫度持續上升的情況下，柱壓會(huì )逐步下降，被分析物的保留時(shí)間也會(huì )隨之縮短，而在柱溫為30℃時(shí)，全部的被分析物都可以得到較好的分離，因此選擇30℃為檢測溫度。

　　2.3 測定波長(cháng)的選擇

　　將混合標準液在190～370nm的波長(cháng)下進(jìn)行光譜掃描，可以知道所測定的4種添加劑的最大吸收波長(cháng)分別為：苯甲酸225nm，山梨酸258nm，糖精鈉207nm，胭脂紅220nm。苯甲酸、糖精鈉在254nm相對于230nm吸收小，相反山梨酸則吸收比較大，因此如果選擇254nm作為檢測波長(cháng)，山梨酸將會(huì )對苯甲酸和糖精鈉的定量造成很大的影響;另外，所測定的4種添加劑在230nm的波長(cháng)下吸收都超過(guò)了254nm，選擇230nm時(shí)這幾種添加劑測定靈敏度是接近的，均具有較強的吸收特性。雖然考慮到LC10_Avp系統能切換波長(cháng)，從綜合情況考慮，最終選定檢測波長(cháng)為230nm。

　　2.4 方法考察

　　2.4.1 線(xiàn)性范圍

　　如表1所示，以4種添加劑的峰面積(Y)對其質(zhì)量濃度(X)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，并且四種添加劑存在良好的線(xiàn)性關(guān)系，相關(guān)系數都超過(guò)了0.999。

　　2.4.2 方法檢出限

　　采用3倍信噪比時(shí)所對應的濃度，4種添加劑在230nm波長(cháng)下，可以計算得出的檢出限為：苯甲酸0.06mg/L，山梨酸0.05mg/L，糖精鈉0.09mg/L，胭脂紅0.06mg/L。

　　2.4.3 干擾實(shí)驗

　　在實(shí)驗條件下，食品中可能存在其他常見(jiàn)添加劑，如檸檬黃、靛藍、亮藍、日落黃、甜蜜素、莧菜紅、誘惑紅、酒石酸等并不干擾測定，可滿(mǎn)足監測工作的需要。

　　2.4.4 準確度和精密度試驗

　　用濃度均為0.01g/L的混合溶液進(jìn)樣10μl，重復進(jìn)行6次分析，各成分測得的峰面積的RSD分別為苯甲酸1.0%，山梨酸1.0%，糖精鈉1.8%，胭脂紅0.7%。這四種添加劑測定的變異系數均小于1.9%，表明具有良好的重復性。

　　本法以某品牌橙汁飲料為本底，測定了苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、胭脂紅這4種添加劑的含量，并分別從高、中、低三個(gè)添加水平測定加標回收率，每個(gè)水平重復5次，其結果如表2所示，從結果可以看出，高效液相色譜法具有較好的重現性以及再現性，回收率范圍為96%～108%。

　　2.4.5 幾種樣品測定

　　運用本方法對市場(chǎng)上所購買(mǎi)的橙汁、可樂(lè )、碳酸飲料等多種液體樣品進(jìn)行檢測，結果令人滿(mǎn)意。例如，從一份橙汁樣品中檢出苯甲酸、胭脂紅的含量，其結果就是加標回收實(shí)驗中用的本底結果。

　　3 結論

　　從以上結果來(lái)看，采用高效液相色譜法，可以同時(shí)測定和分析食品中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、胭脂紅的含量，并且該方法操作簡(jiǎn)單，具有較高的靈敏度和準確性，可滿(mǎn)足對液體樣品進(jìn)行快速檢測的需要，為在廣大的基層實(shí)驗室實(shí)施食品質(zhì)量安全監測提供了行之有效的檢測方法。

　　參考文獻

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