羅 琳1，盧任杰1，盧文杰2*

(1.汕頭市食品檢驗檢測中心，廣東汕頭 515041;2.汕頭市中心醫院，廣東汕頭 515031)

摘 要：利用QuEChERS法提取，采用GC-MS檢測技術(shù)，建立10種有機磷農藥(對硫磷、乙酰甲胺磷、甲基對硫磷、殺螟硫磷、三唑磷、敵敵畏、樂(lè )果、馬拉硫磷、氧樂(lè )果、聯(lián)苯菊酯)的同時(shí)檢測方法，并分析汕頭市白花蛇舌草中OPPs殘留水平及其種類(lèi)。結果表明，10種OPPs在1.0～20.0 mg/mL濃度范圍內，各OPPs定量離子峰面積與質(zhì)量濃度之間呈良好的線(xiàn)性關(guān)系;檢出限為0.02～0.1 mg/kg，定量限為0.07～0.4 mg/kg;加標回收率在89.2%～96.4%，相對標準偏差為1.7%～3.6%。

關(guān)鍵詞：氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法;白花蛇舌草;有機磷農藥;殘留

白花蛇舌草()，又名蛇舌癀、羊須草、蛇針草、節節結蕊草、蛇總管，含有車(chē)葉草甙、車(chē)葉草甙酸、雞屎藤次甙、熊果酸、β-谷甾醇、豆甾醇和對-香豆酸等[1]成分;全草可入藥，性味微苦、微甘，具有清熱解毒、消痛散結、利尿除濕、活血止痛等功效，廣泛分布于廣東、廣西、云南、福建等省份。在潮汕地區，白花蛇舌草常被當地居民當做清熱消暑，解渴止咳的涼茶食用。但在白花蛇舌草種植過(guò)程中，常使用高效廣譜殺蟲(chóng)劑有機磷農藥(Organophosphorus Pesticide, OPPs)進(jìn)行病蟲(chóng)害防治，導致草藥中發(fā)生不同程度的OPPs殘留。

目前關(guān)于OPPs殘留量測定方法包括氣相色譜法(GC)、液相色譜法(LC)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(GC-MS/MS)等[2-5]。其中GC法和LC法特異性差、重復性低;GC-MS/MS具有靈敏度高、特異性強等優(yōu)點(diǎn)，但儀器價(jià)格動(dòng)昂貴而推廣普及率低;GC-MS法具有分析速度快、特異性強、準確度高、精密度好，儀器價(jià)格適與推廣普及率高等特點(diǎn)，因此GC-MS已成為檢驗檢測機構測定OPPs殘留主要檢測技術(shù)。為評估白花蛇舌草中OPPs殘留水平及其種類(lèi)，本研究利用QuEChERS法提取，采用GC-MS檢測技術(shù)，擬建立10種有機磷農藥(對硫磷、乙酰甲胺磷、甲基對硫磷、殺螟硫磷、三唑磷、敵敵畏、樂(lè )果、馬拉硫磷、氧樂(lè )果和聯(lián)苯菊酯)同時(shí)檢測方法，分析汕頭市白花蛇舌草中OPPs殘留水平及其種類(lèi)，為其質(zhì)量控制提供科學(xué)數據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

10種OPPs(對硫磷、乙酰甲胺磷、甲基對硫磷、殺螟硫磷、三唑磷、敵敵畏、樂(lè )果、馬拉硫磷、氧樂(lè )果和聯(lián)苯菊酯)標準品，購自德國Dr.Ehrenstorfer公司;丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷和乙腈，均為色譜純，購自美國天地公司;氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉，均為分析純，購自西隴科學(xué)股份有限公司;石墨化炭黑(GCB)，購于江蘇先豐納米材料科技有限公司。

OPPs標準儲備液：分別準確稱(chēng)取適量的每種OPPs標準品，用丙酮分別配置成濃度為100～1 000 mg/mL的標準儲備溶液。OPPs混合標準工作溶液：根據需要再用丙酮逐級稀釋成適用濃度的系列混合標準工作溶液。

1.2 儀器與設備

Agilent 8890A/5977B型氣質(zhì)聯(lián)用儀(美國安捷倫公司);BSA124S型電子天平，德國Sartorius公司;BUCHI R-200型旋轉蒸發(fā)儀，瑞士BUCHI公司。

1.3 GC-MS/MS條件

1.3.1　色譜條件

色譜柱為DB-5MS毛細管氣相色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);進(jìn)樣口溫度280 ℃;進(jìn)樣方式：無(wú)分流進(jìn)樣，1.5 min后開(kāi)閥;載氣為氦氣，流速為1.0 mL/min;進(jìn)樣量1 μL;溶劑延遲時(shí)間5 min。

程序化升溫程序：初始溫度50 ℃，保持2 min;以30 ℃/min的速度升溫至180 ℃，保持10 min，再以30 ℃/min的速度升溫至270 ℃，保持10 min。

1.3.2　質(zhì)譜條件

電子轟擊離子源(EI);色譜-質(zhì)譜接口溫度270 ℃;離子源溫度200 ℃;檢測方式：選擇離子監測(SRM);10種OPPs化合物的保留時(shí)間、定量和定性選擇離子見(jiàn)表1。

1.4　樣品前處理

1.4.1 提取

將白花蛇舌草粉碎后過(guò)80～100目篩，貯于棕色瓶中。準確稱(chēng)取白花蛇舌草粉末2.0 g置于50 mL離心管中，加入4 mL水和20 mL丙酮，均質(zhì)提取10 min;將提取液過(guò)濾，殘渣再用50 mL丙酮重復提取1次，合并濾液于250 mL分液漏斗中;加入150 mL氯化鈉水溶液和50 mL二氯甲烷，振搖3 min，靜置分層，收集二氯甲烷相;水相再用50 mL二氯甲烷重復提取兩次，合并二氯甲烷相;經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水，待凈化。

1.4.2 凈化

將石墨化炭黑固相萃取柱用6 mL乙酸乙酯-正己烷預淋洗，棄去淋洗液;將2 mL待凈化液傾入上述連接柱中，并用3 mL乙酸乙酯-正己烷分3次洗滌濃縮瓶，將洗滌液傾入石墨化炭黑固相萃取柱中，再用12 mL乙酸乙酯-正己烷洗脫，收集上述洗脫液至濃縮瓶中，于40 ℃水浴中旋轉蒸發(fā)至近干，用乙酸乙酯溶解并定容至1.0 mL，供氣相色譜-質(zhì)譜測定。

2 結果與討論

2.1 氣相-質(zhì)譜條件的優(yōu)化

將標準工作溶液和試樣依次注入色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，在正負離子模式下，分別對10種OPPs進(jìn)行選擇離子監測，并采用多段程序升溫方式對10種OPPs進(jìn)行有效分離。由圖1可知，在多段程序升溫方式下，DB-5MS色譜柱可同時(shí)實(shí)現10種OPPs完全分離，且各化合物的色譜峰響應值高、峰形對稱(chēng)尖銳;經(jīng)微調質(zhì)譜參數，優(yōu)化后的10種OPPs質(zhì)譜條件見(jiàn)表1。

2.2 線(xiàn)性關(guān)系、檢出限和加標回收率

結果顯示，10種OPPs在1.0～20.0 ng/mL濃度范圍內，各OPPs定量離子峰面積與質(zhì)量濃度之間呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，且相關(guān)系數(2)在0.996 3～0.999 1;白花蛇舌草中10種OPPs的檢出限為0.02～0.10 mg/kg，定量限為0.07～0.4 mg/kg;10種OPPs的加標回收率在89.2%～96.4%，相對標準偏差為1.7%～3.6%。

2.3 實(shí)際樣品測定

采用本文所建的GC-MS法對汕頭市隨機采樣的10份白花蛇舌草進(jìn)行10種OPPs殘留水平和種類(lèi)篩查。結果顯示，所檢測樣品中均未檢測到10種OPPs殘留，該OPPs均為被我國明令禁止使用的農藥，可能在白花蛇舌草種植過(guò)程中均未使用。

3 結論

利用QuEChERS法提取，采用GC-MS檢測技術(shù)，成功的建立10種有機磷農藥同時(shí)檢測方法，可為檢驗檢測白花蛇舌草中OPPs殘留水平及其種類(lèi)提供檢測方法。

參考文獻

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[2] 周亮,賀春霞,邱彬,等.氣相色譜質(zhì)譜法快速測定多種基質(zhì)中23種有機磷農藥和2種鼠藥[J].海峽預防醫學(xué)雜志,2021,27(3):7-10.

[3]王威,竇文淵,郭杰煌,等.加速溶劑萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測定污泥中37種有機磷類(lèi)及10種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農藥[J].理化檢驗(化學(xué)分冊),2021,57(7):591-597.

[4]梁浩楠,劉慶波,凌佳音,等.酶法-超聲提取白花蛇舌草總黃酮工藝研究[J].中國藥學(xué)雜志,2021,56(13):1041-1047.

[5]常波,王艷萍,楊帆,等.氣相色譜法同時(shí)測定果蔬中常見(jiàn)有機磷農藥殘留量[J].化學(xué)研究與應用,2021,33(8):1626-1632.

基金項目：汕頭市科技計劃項目([汕府科〔2020〕5號文]，項目編號12)。

作者簡(jiǎn)介：羅琳(1985—)，女，廣東汕頭人，本科，工程師。研究方向：食品檢驗。

通信作者：盧文杰(1983—)，男，廣東汕頭人，本科，主管藥師。研究方向：醫院藥學(xué)。