李鵬飛

(山西省食品藥品檢驗所，山西太原 030031)

摘　要：本文參照GB 5009.17—2014，建立了液相色譜-原子熒光法(LC-AFS)測定水產(chǎn)食品中甲基汞的檢測方法。實(shí)驗表明，在0.5～10.0 ng/mL，甲基汞的峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系較好，相關(guān)系數為0.996 5，方法檢出限為0.006 mg/kg，加標回收率為85.7%～98.9%，為2.1%～3.5%，精密度與穩定性良好，可以滿(mǎn)足水產(chǎn)食品中甲基汞的分析要求。

關(guān)鍵詞：水產(chǎn)食品;甲基汞;液相色譜-原子熒光法

汞是一種具有生物蓄積性與持久性的劇毒物質(zhì)[1]。在元素汞、無(wú)機汞與有機汞3種形態(tài)中，甲基汞的毒性最大，其易被人體吸收且難降解排出，對人體健康危害極大[2]。水生生物吸收水體中的汞，形態(tài)會(huì )隨著(zhù)水生食物鏈的傳遞發(fā)生轉化并不斷富集放大，魚(yú)蝦等水產(chǎn)食品成為人類(lèi)攝入汞的主要風(fēng)險來(lái)源，日本的水俁病事件即是甲基汞的食源性危害引發(fā)，所以加強對水產(chǎn)食品中甲基汞的風(fēng)險評估非常重要[3-4]。目前，甲基汞形態(tài)的檢測方法主要有GC-AFS法、LC-ICP-MS法、HPLC-CV-AFS法和LC-AFS法等，GC-AFS法衍生處理步驟煩瑣，LC-ICP-MS法、HPLC-CV-AFS法成本較高，運行維護復雜，LC-AFS法前處理簡(jiǎn)單、分析成本低。因此，本文結合實(shí)驗室條件設備，參照GB 5009.17—2014[5]中第二法建立了LC-AFS法測定水產(chǎn)食品中的甲基汞的方法。

1　材料與方法

1.1　材料與試劑

大蝦(購自某超市);GBW08675甲基汞溶液標準物質(zhì)、GBW(E)081524乙基汞溶液標準物質(zhì)(均由中國計量科學(xué)研究院提供);甲醇為色譜純;硝酸、鹽酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀、硼氫化鉀、乙酸銨、-半胱氨酸鹽酸均為分析純;實(shí)驗用水為一級超純水。

1.2　儀器與設備

SA-20液相色譜儀，AFS-8230原子熒光光度計(北京吉天儀器);AR224CN電子天平(美國奧豪斯);超聲波提取器;冷凍離心機等。

1.3　實(shí)驗方法

準確稱(chēng)取均勻樣品1 g于15 mL塑料離心管中，加入5 mol/L的鹽酸溶液10 mL，放置過(guò)夜。于室溫下超聲水浴提取1 h，再于4 ℃的冷凍離心機中以8 000 r/min轉速離心15 min。準確吸取2.0 mL上清液至10 mL刻度試管中，逐滴加入6 mol/L的氫氧化鈉溶液調節樣液pH為2～7。加入10 g/L的-半胱氨酸溶液0.1 mL，用超純水定容至刻度，過(guò)0.45 μm有機系濾膜，上機待測，同時(shí)做空白試驗。稱(chēng)取與試樣處理相同的試樣量，按照與試樣處理相同的操作步驟進(jìn)行空白試驗。

1.3.1　標準溶液配制

(1)標準儲備液配制。準確吸取1 mL甲基汞溶液標準物質(zhì)用超純水稀釋定容至50 mL容量瓶中，配制成濃度為

1 000 ng/mL的甲基汞標準儲備液。準確吸取1.31 mL甲基汞溶液標準物質(zhì)用超純水稀釋定容至100 mL容量瓶中，配制成濃度為800 ng/mL的乙基汞標準儲備液。

(2)標準工作系列配制。準確吸取0.2 mL甲基汞儲備液(1 000 ng/mL)、0.25 mL乙基汞儲備液(800 ng/mL)于10 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋定容，配制成甲基汞、乙基汞濃度均為20 ng/mL的混合標準溶液。分別吸取0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL和1.00 mL混合標準溶液至7支10 mL刻度管中，用流動(dòng)相定容至2 mL，配制成濃度為0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、2.0 ng/mL、4.0 ng/mL、6.0 ng/mL、8.0 ng/mL、10.0 ng/mL的混合標準工作系列溶液。

1.3.2　儀器參考條件

(1)液相色譜條件。色譜柱：C18分析柱(150 mm×4.6 mm，5 μm);C18預柱(10 mm×4.6 mm，5μm);流動(dòng)相：5%甲醇+0.06 mol/L乙酸銨+0.1% -半胱氨酸;流速：1.0 mL/min;進(jìn)樣體積：100 μL。

(2)原子熒光條件。光電倍增管電壓：285 V;原子化器高度：8 mm;燈電流：35 mA;載氣流量：500mL/min。

2　結果與分析

2.1　線(xiàn)性范圍及檢出限

將配制的標準工作系列溶液在上述儀器條件下測定，以甲基汞標準系列點(diǎn)濃度為橫坐標，對應的色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線(xiàn)。甲基汞在0.5～10.0 ng/mL范圍內線(xiàn)性關(guān)系較好，其曲線(xiàn)方程為=40 918-12 433，相關(guān)系數為0.996 5。以3倍信噪比(/=3)計算檢出限為0.111 ng/mL，根據國標方法GB 5009.17—2014計算得此方法檢出限為0.006 mg/kg，滿(mǎn)足水產(chǎn)食品中甲基汞的分析要求。

2.2　回收率與重復性

準確稱(chēng)取18份陰性大蝦樣品，分別添加低、中、高3種濃度水平的標準溶液，按照上述試樣處理與儀器條件將低、中、高各個(gè)濃度水平平行測定6次，計算方法的回收率與重復性，結果見(jiàn)表1。該方法的回收率為85.7%～98.9%，重復性為2.1%～3.5%。

2.3　精密度與穩定性試驗

取濃度為10.0 ng/mL的混合標準工作溶液在上述儀器條件下連續測定6次，根據色譜峰面積計算得為4.8%，表明該方法精密度良好。取濃度為10.0 ng/mL的混合標準工作溶液，分別在0 h、12 h、24 h時(shí)上機測定，峰面積依次為648 857.0、672 194.1、638 807.4，表明該方法穩定性良好。

3　結論

本文參照GB 5009.17—2014，建立的LC-AFS法測定水產(chǎn)食品中甲基汞的檢測方法，標準曲線(xiàn)的線(xiàn)性關(guān)系良好，方法的檢出限、回收率、重復性與穩定性等符合相關(guān)標準規范的要求，能夠滿(mǎn)足實(shí)驗室對水產(chǎn)食品中甲基汞的檢測需求，可為市場(chǎng)監管部門(mén)加強魚(yú)蝦等水產(chǎn)食品中甲基汞風(fēng)險監測提供技術(shù)支持。

參考文獻

[1]曾慶文,江暉,李丹,等.利用AFS和LC-AFS測定魚(yú)肉中的總汞與甲基汞[J].分析試驗室,2015,34(11):1259-1262.

[2]肖亞兵,崔穎,陳文碩,等.液相色譜-原子熒光法測定魚(yú)肉中有機汞形態(tài)[J].食品研究與開(kāi)發(fā),2014(21):120-122.

[3]姜帥,李學(xué)偉,秦秀榮,等.淺談食品中甲基汞的測定[J].信息周刊,2019(5):473.

[4]李浩洋,汪海濱,鄧建,等.LC-AFS法測定水產(chǎn)飼料中的甲基汞[J].食品工業(yè),2019,40(4):322-325.

[5]中華人民共和國國家衛生健康委員會(huì ),國家市場(chǎng)監督管理總局.食品安全國家標準食品中總汞及有機汞的測定:GB 5009.17—2014[S].北京:中國標準出版社,2016.