吳曉娜，董 娟，董雪峰

(聊城市食品藥品檢驗檢測中心，山東聊城 252000)

摘 要：目的：建立氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法測定辣椒中咪鮮胺及其代謝產(chǎn)物2,4,6-三氯苯酚殘留的分析方法。方法：樣品采用QuEChERS方法進(jìn)行前處理，以氣質(zhì)聯(lián)用儀多反應監測(MRM)進(jìn)行測定，優(yōu)化質(zhì)譜檢測條件，采用外標法定量。結果：咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚在0.1～2 μg/mL范圍內線(xiàn)性關(guān)系良好，定量限分別為0.006 6 mg/kg和0.000 4 mg/kg，在低、中、高3個(gè)不同添加水平下，咪鮮胺的平均回收率在91.9%～118.3%，相對標準偏差在1.82%～6.95%;2,4,6-三氯苯酚的平均回收率在85.1%～118.0%，相對標準偏差在1.22%～7.64%。結論：建立的氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法靈敏度高、準確度和精密度良好，可用于辣椒中咪鮮胺及其代謝物殘留量的檢測。

關(guān)鍵詞：GC-MS/MS;咪鮮胺;2,4,6-三氯苯酚;辣椒

咪鮮胺是一種被廣泛使用的咪唑類(lèi)殺菌劑，主要的作用機理是抑制細胞膜的重要成分麥角甾醇的生物合成，從而達到鏟除病害的目的[1]，它廣泛用于大田作物、水果蔬菜及各種經(jīng)濟作物病害的防治[2]，其對于辣椒的枯萎病也具有很好的防治效果[3]。通過(guò)對咪鮮胺的大量研究，普遍認為咪鮮胺在進(jìn)入環(huán)境后最終會(huì )降解成2,4,6-三氯苯酚[4-5]，而2,4,6-三氯苯酚的毒性較強，且不易降解，對環(huán)境安全會(huì )造成潛在隱患。目前對于咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚的檢測方法，樣品的前處理不僅復雜煩瑣，而且還會(huì )用到毒性較大的吡啶鹽酸鹽，不利于檢驗人員的健康和環(huán)境的安全。本文通過(guò)研究構建了QuEChERS-氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法測定辣椒中咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚殘留的方法，處理過(guò)程簡(jiǎn)單快速，并具有較高的靈敏度和選擇性。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

乙腈、丙酮、醋酸、無(wú)水硫酸鎂、氯化鈉、PSA、C18、咪鮮胺標準品(北京海岸鴻蒙標準物質(zhì)技術(shù)有限責任公司，標準物質(zhì)編號：GBW(E)081565，濃度100 μg/mL)、2,4,6-三氯苯酚標準品(北京海岸鴻蒙標準物質(zhì)技術(shù)有限責任公司，標準物質(zhì)編號：SB05-059-2008，濃度100 μg/mL)。分析中所有試劑為分析純試劑，水為一級水。

1.2 儀器與設備

7890B-7000C氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀(AgilentTechnologies)、±0.01 g電子天平、均質(zhì)器、離心機和氮吹儀。

1.3 儀器條件

(1)色譜條件。色譜柱：VF-1701MS石英毛細管柱(30 m×0.250 mm×0.25 μm);柱箱程序升溫：40 ℃保持

1 min，然后30 ℃/min升溫至130 ℃，再以5 ℃/min升溫至250 ℃，10 ℃/min升溫至300 ℃保持5 min;進(jìn)樣口溫度：280 ℃;碰撞氣為氮氣，載氣為氦氣，純度≥99.999%;流速：1.2 mL/min;進(jìn)樣量1 μL;進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣。

(2)質(zhì)譜條件。離子源溫度：230 ℃;傳輸線(xiàn)溫度：280 ℃;電離方式：EI;溶劑延遲：5 min;測定方式：多反應監測。

1.4 方法

稱(chēng)取15 g試樣于50 mL離心管中，加入15 mL 1%醋酸乙腈溶液進(jìn)行均質(zhì)提取，在離心管中加入鹽(6 g無(wú)水硫酸鎂，2 g氯化鈉)，迅速混勻，渦旋振蕩1 min，4 000 r/min離心5 min。吸取離心結束的上清液8 mL進(jìn)行凈化處理，加入凈化劑(1 500 mg硫酸鎂，400 mg PSA及400 mg C18)，渦旋振蕩1 min，4 000 r/min離心5 min。吸取凈化完的溶液2 mL于離心管中，進(jìn)行濃縮，氮吹至近干，加入1 mL丙酮復溶，過(guò)濾膜，上機。

2 結果與分析

2.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

對咪鮮胺以及2,4,6-三氯苯酚標準溶液進(jìn)行全離子掃描。選擇碎片中豐度比較高的碎片離子作為定性定量母離子。咪鮮胺母離子碎片為：180(定量離子)、196(定性離子);2,4,6-三氯苯酚母離子碎片為：196(定量離子)、132(定性離子)。檢測在不同碰撞能量下，母離子碎片的碰撞情況，得到母離子-子離子對，表1為優(yōu)化后的母離子-子離子對。

2.2 咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚定性、定量離子圖譜

圖1和圖2為優(yōu)化質(zhì)譜條件下咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚的定性、定量離子圖譜。

2.3 建立基質(zhì)校正曲線(xiàn)

吸取一定量的2,4,6-三氯苯酚和咪鮮胺標準溶液，以?xún)艋蟮睦苯坊|(zhì)溶液為溶劑，配制基質(zhì)混合標準溶液使其終濃度為0.1 μg/mL、0.2 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL。繪制標準曲線(xiàn)得到線(xiàn)性回歸方程，結果見(jiàn)圖3和圖4。2都在0.999以上，表明咪鮮胺及2,4,6-三氯苯酚在0.1～2 μg/mL范圍內線(xiàn)性關(guān)系良好。以10倍信噪比計算方法的定量限(/=10)，咪鮮胺為0.006 6 mg/kg，2,4,6-三氯苯酚為0.000 4 mg/kg。

2.4 回收率和精密度的測定

對辣椒樣品進(jìn)行3水平，6平行實(shí)驗，選擇低、中、高3個(gè)不同濃度進(jìn)行加標實(shí)驗。計算加標回收率以及精密度，結果見(jiàn)表2。

咪鮮胺的平均回收率在91.9%～118.3%，相對標準偏差在1.82%～6.95%;2,4,6-三氯苯酚的平均回收率在85.1%～118.0%，相對標準偏差在1.22%～7.64%。結果表明該方法具有較好的回收率及精密度，能夠滿(mǎn)足辣椒中咪鮮胺及代謝物殘留量的檢測。

3 結論

本文建立了辣椒中咪鮮胺及其代謝產(chǎn)物2,4,6-三氯苯酚殘留量的檢測方法。通過(guò)操作簡(jiǎn)單的QuEChERS前處理方法，利用氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀對咪鮮胺及其代謝產(chǎn)物2,4,6-三氯苯酚殘留量進(jìn)行了定性和定量分析。避免了復雜煩瑣的前處理程序以及毒性試劑的使用。通過(guò)該方法檢測，咪鮮胺和2,4,6-三氯苯酚的定量限分別為

0.006 6 mg/kg和0.000 4 mg/kg，檢測靈敏度高;繪制的5個(gè)點(diǎn)的濃度曲線(xiàn)，線(xiàn)性良好;在3個(gè)不同添加水平下，均獲得了良好的回收率。因此，可采用該方法檢測辣椒中咪鮮胺及其代謝物2,4,6-三氯苯酚殘留量。

參考文獻

[1]盧俊文,李蓉,楊芳,等.氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定水果中咪鮮胺及其代謝物2,4,6-三氯苯酚的殘留量[J].食品科學(xué),2015,36(12):213-217.

[2]高潔,胡德禹,張鈺萍.咪鮮胺及其代謝產(chǎn)物在橙汁中的殘留檢測方法研究[J].農藥科學(xué)與管理,2011,32(6):35-39.

[3]洪艷霞.咪鮮胺與異菌脲混配對辣椒枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的增效作用[J].山西農業(yè)科學(xué),2016,44(3):382-384.

[4]龔道新,樊德方,楊仁斌,等.咪鮮安及其主要代謝物的紫外光譜吸收特性和對蝌蚪急性毒性的研究[J].農業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報,2003(6):749-753.

[5]陳平,柳訓才.咪鮮胺的應用概況及其殘留檢測研究[J].湖北農業(yè)科學(xué),2007(3):478-480.