□ 呂建霞 余翀天 賽默飛世爾科技(中國)有限公司

　　有機氯農藥曾經(jīng)被廣泛使用，其化學(xué)性質(zhì)穩定，在環(huán)境中難以進(jìn)行化學(xué)和生物降解，殘留期長(cháng)，有生物蓄積作用，在我國從1980年開(kāi)始禁用，但其至今仍存在于自然界中，并可通過(guò)食物途徑對人類(lèi)造成危害。作為有機氯農藥的替代品之一，擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農藥在農業(yè)生產(chǎn)中得到了廣泛應用，這類(lèi)農藥施用量較小、易生物降解、殘留期較短，但由于其對病菌、害蟲(chóng)、雜草等具有更強的殺傷作用，因此對哺乳動(dòng)物的傷害不容忽視。目前世界許多國家都對有機氯及擬除蟲(chóng)菊酯農藥的最高殘留限量作了嚴格的規定，其中最嚴苛的應該是日本的肯定列表制度，設定了進(jìn)口食品、農產(chǎn)品中可能出現的734種農藥、獸藥和飼料添加劑的近5萬(wàn)個(gè)暫定標準，對沒(méi)有涉及到的產(chǎn)品，設定了統一標準0.01mg/kg。因此有必要建立一個(gè)前處理過(guò)程簡(jiǎn)單、檢測靈敏度高的方法來(lái)測定果蔬中的有機氯農藥和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農藥。

　　儀器

　　Trace1310氣相色譜儀，配ECD檢測器(Thermo Scientific);AS1310自動(dòng)進(jìn)樣器(Thermo Scientific);高速均質(zhì)儀;離心機;天平;旋轉蒸發(fā)儀;

　　耗材

　　色譜柱：TG-5MS (30mx0.25mmx0.25μm)。

　　試劑與標準品

　　標 準 品 (α- 六 六 六，β- 六 六 六，γ- 六 六 六，δ-六六六，六氯苯，氯硝胺，西瑪津，莠去津，五氯硝基苯，百菌清，敵稗，乙烯菌核利，七氯，艾氏劑，腐霉利，o,p'-DDD，o,p'-DDT，p,p'-DDE，p,p'-DDD，p,p'-DDT，硫丹，丁草胺，狄氏劑，乙酯殺螨醇，異狄氏劑，三氯殺螨醇，異菌脲，胺菊酯，聯(lián)苯菊酯，甲氰菊酯，高效氯氟氰菊酯，氯菊酯，氟氯氰菊酯，氯氰菊酯，氟氰戊菊酯，氰戊菊酯，溴氰菊酯，氟胺氰菊酯) 由百靈威公司提供，乙腈、甲苯等有機試劑為Fisher公司提供。其他未注明試劑均為分析純，由國藥集團試劑有限公司提供。

　　標準溶液的制備

　　儲備液：準確稱(chēng)取10.0mg農藥標準品，用正己烷稀釋?zhuān)鹨慌渲瞥?00mg/L單一農藥標準儲備液，儲存在冰箱中備用。

　　混合標準中間液：將38種農藥逐一吸取1mL的單個(gè)農藥儲備液分別注入同一容量瓶中，用正己烷稀釋定容至100mL，得到濃度為1mg/L的混合標準中間液。

　　混合標準工作溶液：取混合標準中間液，用甲苯稀釋配制成20、40、100、200、400μg/L，待GC/ECD分析。

　　樣品前處理

　　稱(chēng)取經(jīng)磨碎的試樣20.00g，加入40mL乙腈均質(zhì)提取1min，加入5.0g氯化鈉，繼續均質(zhì)1min。然后以10000rpm的速度離心10min，取上清液20mL至旋轉蒸發(fā)瓶中蒸至近干。待固相萃取凈化。于Cleanert PC/NH2-SPE小柱 (500mg，6mL)上層添加1cm高無(wú)水Na2SO4;先用8mL乙腈+甲苯(3+1，體積比)淋洗層析柱，小柱淋洗后下面接上旋轉蒸發(fā)瓶接收溶液，再將濃縮后的提取液用6mL乙腈+甲苯(3+1，體積比)分三次洗滌旋蒸瓶，轉移至層析柱內，然后用25mL乙腈+甲苯(3+1，體積比)混合溶劑洗脫，洗脫液旋轉蒸發(fā)濃縮近干后，用甲苯定容至1.0mL待上機分析。

　　實(shí)驗條件

　　色譜柱：TG-5MS (30mx0.25mmx0.25μm);

　　柱溫：60℃(1min)，15℃/min到180℃(3min)，5℃/min到230℃(1min)，最后20℃/min至280℃(20min);

　　進(jìn)樣模式：不分流進(jìn)樣，不分流時(shí)間為1min;

　　進(jìn)樣量：1μL;

　　進(jìn)樣口溫度：280℃;

　　載氣：氮氣 (99.999%)，恒流模式，1mL/min;

　　檢測器溫度：300℃;尾吹氣：氮氣，流速：15mL/min。

　　結果與討論

　　取20μg/L標準溶液，按照上述色譜條件測定，得到色譜圖1。

　　配制38種農藥組份的混合標準溶液，各濃度分別為:20.0,40.0,100.0,200.0, 400.0μg/L，采用上述方法分別進(jìn)樣分析，考察各組分在20.0～400μg/L濃度范圍內的線(xiàn)性。方法回收率和重現性的考察：甘藍和水果黃瓜樣品分別進(jìn)行加標回收實(shí)驗，加標水平為10μg/kg，做3個(gè)平行樣品，計算回收率和精密度。以3倍信噪比計算各組分的萬(wàn)法檢出限。結果表明，38種農藥組分線(xiàn)性關(guān)系良好，回收率在71.3%～113.6%之間，精密度(RSD值，n=3)在2.7%～9.9%之間，檢出限在0.1～2.0μg/kg之間，儀器檢測靈敏度高。

　　實(shí)際樣品測試

　　采用樣品加標，觀(guān)察各色譜峰出峰情況(圖2)。對實(shí)際樣品測試，也未出現色譜峰干擾情況。標準溶液、樣品、樣品加標譜圖見(jiàn)圖2。

　　結論

　　采用賽默飛世爾新型的氣相色譜儀檢測果蔬中的農藥殘留，準確定量目標物，RSD值小，靈敏度高，無(wú)雜質(zhì)峰干擾。石墨碳/氨基復合固相萃取小柱能夠去除果蔬中的基質(zhì)干擾，方法簡(jiǎn)單，自動(dòng)化程度高，凈化效果理想。