針對食源性微生物污染引起的食品安全問(wèn)題，卡尤迪生物為業(yè)界帶來(lái)了前沿的技術(shù)支持，和優(yōu)良的解決方案。為此，《食品安全導刊》記者采訪(fǎng)了卡尤迪生物科技有限公司副總經(jīng)理單長(cháng)輝先生。

　　記者：國內食品微生物檢測現狀如何?都有哪些檢測技術(shù)?

　　單長(cháng)輝：在國內，食品受到食源性微生物污染現象比較嚴重，食源性致病菌對人體造成傷害甚至死亡，而且近年來(lái)微生物引起的食品安全問(wèn)題呈逐年遞增態(tài)勢，廣大老百姓及政府部門(mén)對此也十分關(guān)注，一旦發(fā)生食源性微生物污染事件對食品企業(yè)的信譽(yù)和形象都會(huì )產(chǎn)生不利的影響，公眾對政府部門(mén)處置的能力也會(huì )產(chǎn)生質(zhì)疑。目前檢測方法主要分為傳統的微生物培養方法和以金標、酶免和PCR為代表的快速檢測方法。

　　記者：食品微生物檢測，卡尤迪有何好的解決方案?

　　單長(cháng)輝：由卡尤迪獨創(chuàng )的“一步法”免核酸提取熒光定量PCR技術(shù)平臺針對于各種食源性細菌和病毒，如大腸桿菌O175、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、李斯特菌、彎曲菌、諾如病毒等可以進(jìn)行快速，準確的鑒定。利用卡尤迪“一步法”實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統可以在大型實(shí)驗室、基層實(shí)驗室、現場(chǎng)進(jìn)行食品病原微生物核酸檢測，其特點(diǎn)是不需要核酸提取步驟，靈敏度高。在不增菌的情況下直接檢測牛奶、雞蛋、肉類(lèi)等食品中病原微生物，靈敏度可達102 cfu/mL，符合相關(guān)行業(yè)標準。對于國標中不得檢出的微生物，可以利用市售快速增菌培養基進(jìn)行4~6小時(shí)的增菌過(guò)程，增菌過(guò)后直接檢測，可以達到相關(guān)要求。在食品微生物檢測中通常是定性檢測，卡尤迪“一步法” 實(shí)時(shí)熒光定量既可以進(jìn)行定性檢測，又可以通過(guò)與標準品對比做到絕對定量與相對定量，定量范圍在檢出限102 cfu/mL以上。

　　記者：Mini8實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀基于何原理快檢?

　　單長(cháng)輝：基于的是熒光定量PCR的原理，PCR擴增時(shí)在加入一對引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個(gè)報告熒光基團和一個(gè)淬滅熒光基團。探針完整時(shí)，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開(kāi)始時(shí), 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時(shí)，Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。理論上只要加樣的樣本中有一個(gè)致病微生物便可以被檢測出來(lái)，具有極高的靈敏度，這就大大縮短了前增菌的時(shí)間，可以在4個(gè)小時(shí)左右達到國標不得檢出的標準。PCR是聚合酶鏈式反應,是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點(diǎn)，是能將微量的DNA大幅增加。理論上只需要有1個(gè)DNA分子就可以在1個(gè)小時(shí)的時(shí)間內擴增到數以?xún)|記的DNA分子，我們使用的熒光定量PCR是在PCR擴增時(shí)在加入一對引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個(gè)報告熒光基團和一個(gè)淬滅熒光基團。探針完整時(shí)，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開(kāi)始時(shí), 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時(shí)，Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號。這樣加入Taqman探針的熒光定量PCR具有極高的特異性，產(chǎn)生假陽(yáng)性的幾率非常之低，保證了檢測的準確性。

　　記者：PCR儀相比同類(lèi)產(chǎn)品有何亮點(diǎn)和競爭力?

　　單長(cháng)輝：PCR的方法相對于傳統的培養方法和快檢中的酶免金標等方法具有速度快、準確性高的特點(diǎn)，由于PCR所檢測的是微生物的核酸，而且能在1小時(shí)內大量擴增檢測，這是其他方法所做不到的，傳統的培養方法時(shí)間往往需要2~3天，而酶免等方法也需要1天的時(shí)間，PCR方法在4~6個(gè)小時(shí)內完成檢測，時(shí)間上具有很大優(yōu)勢。在準確性上由于PCR方法檢測DNA片段的引物探針具有極高的特異性，在檢測的準確性上也要高于酶免金標等方法。

　　記者：Mini8實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀有何特點(diǎn)與優(yōu)勢?

　　單長(cháng)輝：Mini8便攜式熒光定量PCR儀，將PCR熱循環(huán)與熒光檢測和各種軟件算法有機結合，可實(shí)時(shí)觀(guān)察到PCR反應每次擴增中產(chǎn)物的動(dòng)態(tài)變化。PCR之后，即可馬上得到定量結果，免去了傳統 PCR后續的PCR產(chǎn)物純化，凝膠電泳分析等費時(shí)費力的環(huán)節。 通過(guò)采用創(chuàng )新性的光學(xué)檢測系統，Mini8能為用戶(hù)有效節約單個(gè)反應的試劑成本，反應體積可配置15~150UL，一個(gè)半小時(shí)左右即可得到精準的定量結果。此外，Mini8是市場(chǎng)上唯一一款可使用12V直流電源，可車(chē)載，可在移動(dòng)環(huán)境使用的實(shí)時(shí)熒光定量PCR，非常適合現場(chǎng)檢測，針對突發(fā)食品安全事件具有不可比擬的優(yōu)勢。

　　記者：卡尤迪產(chǎn)品有何檢測的成功案例?分享給大家?

　　單長(cháng)輝：在不增菌的情況下直接檢測牛奶、雞蛋、肉類(lèi)等食品中病原微生物，從拿到樣本到出結果時(shí)間控制在90分鐘以?xún)?。如果進(jìn)行快速增菌步驟，經(jīng)過(guò)4小時(shí)的增菌，總的檢測時(shí)間控制在6小時(shí)以?xún)?。由于卡尤迪一步法技術(shù)平臺剛上市不久，在食品方面應用還不是很廣泛，但在檢驗檢疫、病毒檢測上應用十分廣泛，卡尤迪研發(fā)的基于一步法技術(shù)平臺的寨卡病毒檢測試劑已經(jīng)在北京、浙江、上海、深圳、廣州、福建、遼寧等地檢驗檢疫局和疾病預防與控制中心得到了大面積的應用，可以直接在機場(chǎng)口岸等地對疑似病例進(jìn)行現場(chǎng)檢驗。同時(shí)我們的一步法技術(shù)平臺在動(dòng)物疫病檢測、癌癥篩查、個(gè)性化用藥指導、乙肝丙肝檢測、突發(fā)應急事件中得到了廣泛應用。

　　記者：卡尤迪產(chǎn)品的市場(chǎng)推廣情況與客戶(hù)評價(jià)如何?

　　單長(cháng)輝：我們現在已經(jīng)開(kāi)發(fā)了部分食源性微生物檢測試劑盒，可以直接對復雜的食品樣本進(jìn)行檢測，由于免去了復雜的核酸提取過(guò)程，在同類(lèi)PCR產(chǎn)品中卡尤迪具有操作簡(jiǎn)便、檢測時(shí)間短的優(yōu)勢，由于卡尤迪一步法技術(shù)平臺剛上市不久，在食品方面應用還不是很廣泛，但在檢驗檢疫、病毒檢測上應用十分廣泛，客戶(hù)的總體評價(jià)就是方便、快速、準確。如今在《食品安全導刊》媒體平臺的幫助下，把我們的產(chǎn)品推廣給了全國各級食監部門(mén)、檢驗所、食品企業(yè)、流通、零售終端及更多用戶(hù)，使得我們的產(chǎn)品獲得了越來(lái)越廣泛的歡迎與贊譽(yù)。