□ 高慧 李長(cháng)坤 李月琪 島津企業(yè)管理(中國)有限公司北京分析中心

　　我國新頒布的GB/T 2763-2014 《食品中農藥最大殘留限量》，將于8月1日起開(kāi)始施行，食品農藥最大殘留限量指標新增1357項。面對大量的受管控農藥和很低的允許殘留量，開(kāi)發(fā)高靈敏分析方法顯得更為迫切。本文參考美國AOAC規定的樣品前處理方法，使用島津超高效液相色譜儀LC-30A和三重四極桿質(zhì)譜LCMS-8050聯(lián)用，建立了蔬菜中37種例行監測農藥的超高效液相色譜——三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用的分析方法。

　　實(shí)驗

　　儀器

　　本實(shí)驗使用島津超高效液相色譜儀LC-30A與三重四極桿質(zhì)譜儀LCMS-8050聯(lián)用系統。具體配置為L(cháng)C-30AD×2輸液泵，DGU-20A5在線(xiàn)脫氣機，SIL-30AC自動(dòng)進(jìn)樣器，CTO-30A柱溫箱，CBM-20A系統控制器，LCMS-8050三重四極桿質(zhì)譜儀。

　　分析條件

　　液相色譜條件

　　分析儀器：LC-30A系統;

　　色譜柱：Shim-pack XR-ODSIII, 2.0mm I.D.×150mm L,2.2μm;

　　流動(dòng)相：A：5mM醋酸銨+0.02%甲酸水溶液;B：甲醇;

　　流速：0.4mL/min;

　　進(jìn)樣體積：1μL;

　　柱溫：40℃;

　　洗脫方式：梯度洗脫，B相初始濃度為10%。

　　質(zhì)譜條件

　　分析儀器：LCMS-8050;

　　離子源：ESI，正負離子同時(shí)掃描;

　　離子源接口電壓：+4.5kV; -3.5kV;

　　霧化氣：氮氣3.0L/min;干燥氣：氮氣10L/min;加熱氣：氮氣10L/min;碰撞氣：氬氣;脫溶劑管溫度：250℃;加熱模塊溫度：400℃;接口溫度：250℃;掃描模式：多反應監測(MRM);駐留時(shí)間：10ms;延遲時(shí)間：3ms。

　　樣品制備

　　樣品前處理方法：參照美國AOAC 2007.01QuEChERS樣品前處理方法，使用島津技邇QuEChERS產(chǎn)品進(jìn)行樣品前處理。取15g均質(zhì)樣品加入50mL離心管中，加入15mL乙腈/甲酸(99/1，v/v)提取液，渦混后加入6gMgSO4和1.5gNaOAc，迅速進(jìn)行振蕩，然后離心5min(8000rpm)。取上清液1mL，加入盛有150mgMgSO4，50mgPSA，50mgC18粉末的離心管中，渦混離心，上清液過(guò)濾膜后上機。

　　標準溶液配制：用甲醇配制500mg/L，37種混合標準溶液，用基質(zhì)提取液逐級稀釋成0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L的不同濃度的標準樣品。

　　結果與討論

　　線(xiàn)性關(guān)系

　　將配制的0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L不同濃度的標準溶液，按上述分析條件進(jìn)行測定，外標法制作校準曲線(xiàn)，線(xiàn)性良好。

　　精密度實(shí)驗

　　對0.5μg/L、1.0μg/L和5.0μg/L混合標準溶液連續6次進(jìn)樣，考察儀器的精密度，其保留時(shí)間和峰面積的重復性結果如表1所示。3個(gè)濃度標準品的保留時(shí)間和峰面積的相對標準偏差分別在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之間，儀器精密度良好。

　　基質(zhì)提取液加標精密度實(shí)驗

　　用空白的普通白菜、甘藍、菜豆三種基質(zhì)提取液加混標至濃度為5μg/L，連續20針進(jìn)樣，考察保留時(shí)間和峰面積穩定性，保留時(shí)間和峰面積的相對標準偏差分別在0.02%～0.22%和0.63%～4.93%之間。具體結果如表2。

　　回收率實(shí)驗

　　將空白甘藍樣品進(jìn)行5.0μg/L和50.0μg/L濃度加標后，按照上述樣品制備方法處理后上機，平行3份樣品考察回收率和RSD。具體結果見(jiàn)表3。5.0μg/L加標回收率在80.5%～105.2%之間，50.0μg/L加標回收率在89.6%～104.5%之間。

　　實(shí)際樣品分析

　　對市售普通白菜進(jìn)行分析后，檢出多菌靈、三唑酮、咪鮮胺和噠螨靈，具體結果及色譜圖見(jiàn)表4、圖1。

　　結論

　　建立了一種使用島津超高效液相色譜儀LC-30A和三重四極桿質(zhì)譜儀LCMS-8050聯(lián)用測定蔬菜樣品中37種農藥的方法，在20min內完成37種農藥的分離。不同濃度的精密度實(shí)驗結果表明：保留時(shí)間和峰面積的相對標準偏差分別在0.02%～0.17%和0.59%～4.89%之間，儀器精密度良好;校準曲線(xiàn)相關(guān)系數均大于0.995;儀器檢出限在0.002～0.143μg/L之間，定量限在0.0072～0.433之間;不同蔬菜基質(zhì)中5μg/L濃度加標的保留時(shí)間和峰面積的相對標準偏差分別在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之間;采用QuEChERS前處理方法的加標回收率在80.5%～105.2%之間。該方法分析速度快、重復性好、靈敏高，適合蔬菜中常用農藥的高靈敏度檢測。