□ 邱雄雄 詹松 島津企業(yè)管理(中國)有限公司

　　呋喃苯烯酸鈉屬于硝基呋喃類(lèi)藥物,是人工合成的一種廣譜抗菌藥物,對動(dòng)物和魚(yú)類(lèi)的細菌預防和治療有良好效果。但是,世界衛生組織和聯(lián)合國糧農組織聯(lián)合報道硝基呋喃類(lèi)藥物具有潛在的致突變和致癌性。為保護消費者的健康，世界各國紛紛禁止硝基呋喃類(lèi)藥物在食品動(dòng)物上的使用。然而，這些藥物的違法使用現象仍然存在。

　　目前，國內外色譜法對呋喃苯烯酸鈉殘留檢測主要采用HPLC-UV作為檢測手段，而HPLC法由于檢測靈敏度低、前處理操作繁瑣費時(shí),不能滿(mǎn)足進(jìn)出口貿易中各國對呋喃苯烯酸鈉殘留限量要求。為保證我國有關(guān)食品的進(jìn)出口貿易，促進(jìn)呋喃苯烯酸鈉殘留監控工作的順利開(kāi)展,建立一種快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、準確度好的檢測方法勢在必行。

　　本文使用島津LCMS-8040三重四極桿質(zhì)譜，參考《SN/T 2451-2010 動(dòng)物源性食品中呋喃苯烯酸鈉殘留量檢測方法 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》，建立了UHPLC-MS/MS法檢測乳制品中呋喃苯烯酸鈉殘留。采用乙腈提取，正己烷萃取凈化,方法簡(jiǎn)便、快速，可用于乳制品進(jìn)出口樣品的監控和檢測。

　　實(shí)驗

　　儀器

　　實(shí)驗使用島津超高效液相色譜儀LC-30A與三重四極桿質(zhì)譜儀LCMS-8040聯(lián)用系統。具體配置為：LC-30AD×2輸液泵，DGU-20A5在線(xiàn)脫氣機，SIL-30AC自動(dòng)進(jìn)樣器，CTO-30A柱溫箱，CBM-20A系統控制器，LCMS-8040三重四極桿質(zhì)譜儀，LabSolutions Ver.5.53色譜工作站。

　　分析條件

　　液相色譜條件

　　分析儀器：LC-30A系統;

　　色譜柱：Shimadzu Shim-pack XR-ODSIII 2.0mmI.D.×50mmL,1.6μm;

　　流速：0.2mL/min;

　　進(jìn)樣體積：5μL;

　　柱溫：40℃;

　　流動(dòng)相：A-0.1%甲酸水;B-乙腈;

　　洗脫方式：梯度洗脫，B相初始濃度45%，梯度洗脫見(jiàn)表1。

　　質(zhì)譜條件

　　分析儀器：LCMS-8040;

　　離子源：ESI，負離子掃描;

　　離子源接口電壓：4.5kV;

　　霧化氣：氮氣3.0L/min;

　　干燥氣：氮氣20L/min;

　　碰撞氣：氬氣;

　　脫溶劑管溫度：250℃;

　　加熱模塊溫度：450℃;

　　掃描模式：多反應監測(MRM);

　　駐留時(shí)間：150ms;

　　延遲時(shí)間：3ms;

　　MRM參數見(jiàn)表2。

　　樣品制備

　　樣品前處理方法

　　參考《SN/T 2451-2010 動(dòng)物源性食品中呋喃苯烯酸鈉殘留量檢測方法 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》前處理方法。

　　稱(chēng)取約5g牛奶試樣，置于50mL聚丙烯具塞離心管中，加入5g無(wú)水硫酸鈉混勻后，加入25mL乙腈，渦旋混勻30s，超聲提取5min，于4000r/min離心5min。上清液轉移至50mL容量瓶中。殘渣依上述方法再提取一次，合并上清液，混勻后用乙腈定容至50mL。移取10mL提取液，于40℃氮氣吹至近干，加入1.0mL0.1%甲酸溶液+乙腈(4∶1)溶液渦旋30s溶解殘渣。向溶解液中加入3mL乙腈飽和正己烷，震蕩后靜置分層，取下層溶液于9500rpm離心5min，過(guò)濾上機測試。

　　標準溶液配制

　　用甲醇配制10mg/L的混合標準中間溶液，用乳制品空白基質(zhì)溶液稀釋成濃度為1、10、25、50、100µg/L標準工作液。

　　結果討論

　　呋喃苯烯酸鈉標準樣品一級質(zhì)譜圖和產(chǎn)物離子掃描質(zhì)譜圖及呋喃苯烯酸鈉標準溶液MRM色譜圖見(jiàn)圖2、圖3。

　　線(xiàn)性關(guān)系

　　按以上分析條件進(jìn)行測定，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，以1、10、25、50、100µg/L標準工作液濃度點(diǎn)，采用外標法建立校準曲線(xiàn)，如圖4所示，呋喃苯烯酸鈉在線(xiàn)性濃度范圍內線(xiàn)性相關(guān)性良好，相關(guān)系數為0.9993。(校準曲線(xiàn)參數見(jiàn)圖3)

　　檢出限和定量限

　　配制7份1µg/L標準溶液，進(jìn)樣分析，對上述測定結果剔除離群值后將各自的7次測定結果計算其標準偏差S，此時(shí)檢出限MDL=3.14×S，定量限LOQ=4×MDL。測定結果如表4所示。

　　精密度實(shí)驗

　　配制低中高濃度的混合標樣依次平行測定6次，呋喃苯烯酸鈉的保留時(shí)間和峰面積的相對標準偏差分別在0.07%～0.107%和0.98%～1.51%之間，結果表明系統具有良好的精密度。

　　實(shí)際樣品分析及回收率實(shí)驗

　　將所建立的分析方法用于實(shí)際樣品分析，檢測牛奶樣品，未檢測到呋喃苯烯酸鈉。圖5為牛奶樣品的MRM色譜圖。在牛奶樣品中添加濃度為1.0µg/kg的混合標準溶液，加標樣品MRM色譜圖如圖6所示，加標回收率結果見(jiàn)表6。

　　結論

　　本文建立了一種使用島津三重四極桿質(zhì)譜儀LCMS-8040測定乳制品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的分析方法。呋喃苯烯酸鈉在1～100µg/L線(xiàn)性范圍內線(xiàn)性良好，相關(guān)系數達到0.9999。對低中高不同濃度的混合標準溶液進(jìn)行精密度實(shí)驗，連續6次進(jìn)樣保留時(shí)間和峰面積的相對標準偏差在0.07%～0.107%和0.98%～1.51%之間，儀器精密度良好?？疾炫Ｄ虡悠贩治黾凹訕藢?shí)驗，呋喃苯烯酸鈉的回收率范圍為86.4%，可以滿(mǎn)足乳制品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的檢測需求。