講師介紹：
    張勛，江蘇美正生物科技有限公司研發(fā)總監，江蘇大學(xué)碩士、江南大學(xué)博士及博士后，從事食品安全快速檢測相關(guān)研究及產(chǎn)業(yè)化工作11年，熟悉小分子抗原合成與鑒定、多抗制備、單克隆抗體制備、前處理方法開(kāi)發(fā)、免疫層析、ELISA、理化檢測產(chǎn)品開(kāi)發(fā)等相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域。
    中國是世界第一的肉類(lèi)生產(chǎn)大國，肉類(lèi)食品在生活中也是必不可少的食物來(lái)源。近年來(lái)，我國肉類(lèi)消費占比進(jìn)一步上升，同時(shí)肉類(lèi)食品問(wèn)題事件也越來(lái)越突出。屢被曝光的肉類(lèi)食品安全問(wèn)題對人體健康、動(dòng)物疾病防控以及生態(tài)環(huán)境等造成了很大危害，也造成了我國動(dòng)物性食品出口他國的限制。在3月22日舉辦的“肉類(lèi)食品安全的保障與控制網(wǎng)絡(luò )研討會(huì )”上，來(lái)自江蘇美正生物科技有限公司的研發(fā)總監張勛對肉類(lèi)食品的獸藥殘留進(jìn)行了講解，旨在提高肉類(lèi)食品中獸藥殘留的檢測水平，加強我國肉類(lèi)食品安全監管，使我國肉類(lèi)食品生產(chǎn)和消費體制不斷健全、完善，保障人民生活中的食品安全。
　　　
常見(jiàn)的快速檢測產(chǎn)品形式
    從事食品安全檢測的人都知道常見(jiàn)的食品安全檢測方法——儀器方法和快速方法，研討會(huì )上，張勛主要介紹了快速檢測?？焖贆z測方法從檢測原理上看，可分為基于理化性質(zhì)的檢測和基于免疫學(xué)的檢測，其中免疫學(xué)方法主要是利用抗原抗體的特異性結合建立的方法，目前產(chǎn)品使用較多的方法有ELISA、免疫層析等。
    酶聯(lián)免疫（ELISA）產(chǎn)品檢測靈敏度高，但檢測過(guò)程中需要經(jīng)過(guò)洗板、多次加液等多個(gè)步驟，檢測過(guò)程還需要使用一定的儀器設備，如借助酶標儀讀數。該檢測下限可達0.01μg/kg（ppb），單批樣本檢測時(shí)間為1~2小時(shí)，更適用于批量樣本檢測。膠體金產(chǎn)品有兩種類(lèi)型——檢測卡和試紙條，這兩種形式的產(chǎn)品雖包裝不同，但檢測原理相同，均具有靈敏度高、檢測速度快、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)，單個(gè)樣本檢測僅需5~10分鐘，結果可以直接目測，也可與讀數儀聯(lián)用，接入數據平臺系統，適用于現場(chǎng)快速檢測。
    儀器檢測和快速檢測各有優(yōu)缺點(diǎn)，但兩者并不是對立的關(guān)系，因為其各自的適用范圍和條件不同。在實(shí)際應用中，最好的檢測模式就是使兩者相互配合，大量樣本初篩使用快速檢測，然后陽(yáng)性或疑似陽(yáng)性的樣本使用儀器檢測進(jìn)行確證。 常見(jiàn)的禁用獸藥種類(lèi)
    禁用獸藥的依據一般為（農業(yè)部）公告、法規、國家標準等，常見(jiàn)的禁用農藥有如下幾種。
    ①肉精類(lèi)（β-興奮劑類(lèi)）
    瘦肉精主要包括克侖特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、西馬特羅、苯乙醇胺A、班布特羅、齊帕特羅、氯丙那林、馬布特羅、西布特羅、溴布特羅等。瘦肉精類(lèi)膠體金產(chǎn)品較早用于食品安全快速檢測，同時(shí)也是使用量最大的產(chǎn)品之一，一般檢測限3-3-5μg/kg，目前已出現0.5μg/kg的產(chǎn)品。瘦肉精一般通過(guò)動(dòng)物尿液和組織來(lái)進(jìn)行檢測，在對尿液樣本進(jìn)行檢測時(shí)要注意不同地區的動(dòng)物和不同種類(lèi)的動(dòng)物其尿液基質(zhì)會(huì )存在差異。
     ②氯霉素
    氯霉素很早就被我國列入禁止使用的范圍，儀器方法和膠體金方法檢測限均為0.1μg/kg，檢測精度較高，其在貝類(lèi)、蜂蜜中檢出較多。值得注意的是，同類(lèi)藥物中氟苯尼考在雞蛋中禁止檢出。
    ③硝基呋喃類(lèi)
    硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)是我國食品藥品監管部門(mén)比較重視的一類(lèi)檢測物質(zhì)，其原型藥在生物體內代謝迅速，但代謝產(chǎn)物和蛋白質(zhì)結合相當穩定，故常利用代謝物的檢測來(lái)反應硝基呋喃類(lèi)藥物的殘留狀況。儀器方法和膠體金方法檢測限均可達到0.5μg/kg，膠體金方法中使用消線(xiàn)法比使用比色法判讀優(yōu)勢更加明顯。
    ④孔雀石綠
    孔雀石綠是一種有毒的三苯甲烷類(lèi)化學(xué)物，并不是所有的肉類(lèi)食品中都有，其常見(jiàn)于水產(chǎn)品之中，但近年來(lái)被多次通報，屢禁不止。膠體金方法檢測限均可達0.5μg/kg，與儀器方法保持統一水平。一般禁用獸藥有兩個(gè)特點(diǎn)，一是有毒性、危害大，另一個(gè)是在體內殘留時(shí)間長(cháng)，而孔雀石綠就是這樣一種物質(zhì)。有文獻中提到室內模擬實(shí)驗發(fā)現水體中LMG初始濃度為1 ng/mL，兩個(gè)月后在羅非魚(yú)肌肉中的積累濃度高達60 ng/g。
 
    ⑤硝基咪唑類(lèi)
    硝基咪唑類(lèi)物質(zhì)包括甲硝唑（Metronidazole）、地美硝唑（Dimetronidazole）及其鹽、酯及制劑，具有致突變性和潛在的致癌性，被許多國家列為違禁藥物。農業(yè)部公告第193號規定不準以抗應激、提高飼料報酬、促進(jìn)動(dòng)物生長(cháng)為目的在食品動(dòng)物飼養過(guò)程中使用。儀器方法檢測限為0.2μg/kg，定量限1.0μg/kg，膠體金檢測限目前可以做到0.5μg/kg。
    ⑥喹乙醇代謝物MQCA
    喹乙醇代謝物MQCA是2017年“3·15”晚會(huì )曝光的藥物，被稱(chēng)為“新型瘦肉精”。農業(yè)部公告第168號中規定：喹乙醇只能用于體重低于35千克的豬，飼料中添加量不得高于50 ppm，禁止用于家禽及水產(chǎn)養殖。藥典辦[2017]14號，建議停止氨苯砷酸、洛克沙胂和喹乙醇用于動(dòng)物促生長(cháng)；2015版獸藥典沒(méi)有收錄喹乙醇代謝物MQCA。儀器方法和膠體金方法檢測限均可達到0.5μg/kg，另外江蘇美正專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)了免疫親和柱配套的儀器方法，回收率更穩定。
    ⑦喹諾酮類(lèi)/磺胺類(lèi)
    喹諾酮類(lèi)/磺胺類(lèi)中部分藥物為禁用，同時(shí)也是歐美主要關(guān)注的藥物之一，出口企業(yè)應多加重視。相對于組織類(lèi)樣本，蛋雞禁用較多，因此雞蛋中限制更嚴格。此類(lèi)快速檢測產(chǎn)品大多數是識別一類(lèi)藥物，因此與實(shí)際的需求可能有誤差，用戶(hù)需要理解交叉反應的含義，針對自己的需求權衡。檢測時(shí)，一般多采用水性溶液提取，氮吹方法要注意某些藥物的回收率可能不夠好。
    ⑧其他項目
    除以上主要禁用藥物外，還有抗病毒類(lèi)藥物、激素與蛋白同化類(lèi)藥物、精神鎮靜類(lèi)藥物等，需要注意的是針對雞蛋或者牛奶，禁用的藥物種類(lèi)會(huì )有所不同。 常見(jiàn)問(wèn)題及注意事項
    無(wú)論是儀器檢測還是快速檢測，首先要注意污染問(wèn)題，因為污染無(wú)處不在，又難以發(fā)現，常常被人們忽視。此外，看似不經(jīng)意的動(dòng)作，往往會(huì )造成很大誤差，通常只有經(jīng)驗豐富的操作員才能避免或分析其發(fā)生的原因。常見(jiàn)的污染有操作人員使用的化妝品、記號筆、人用藥物等?；瘖y品中常見(jiàn)的污染物質(zhì)為氯霉素、磺胺、喹諾酮、四環(huán)素類(lèi)藥物；人用藥常帶來(lái)的污染有頭孢類(lèi)、阿奇霉素、金剛烷胺等；記號筆含有較高含量的孔雀石綠，在檢測孔雀石綠時(shí)應盡量避免記號筆的使用。與此同時(shí)，采樣環(huán)節的操作細節也會(huì )對后續檢測帶來(lái)影響，所以一定要有良好的操作習慣，避免污染源的帶入。
    其次，需要注意的事項還有操作的濕度和溫度，因為溫度和濕度過(guò)高或過(guò)低都會(huì )影響測量的準確性，一般要求在室溫下操作（25℃左右）。產(chǎn)品打開(kāi)之后應盡快使用，或在產(chǎn)品要求的時(shí)間內使用，否則產(chǎn)品將失效，檢測結果也會(huì )變得毫無(wú)意義。判讀時(shí)間、方式也應詳細閱讀說(shuō)明書(shū)，根據要求進(jìn)行操作。
    對于快檢產(chǎn)品有一個(gè)很重要的環(huán)節就是產(chǎn)品的驗證，因為快檢產(chǎn)品是用來(lái)衡量某一物質(zhì)的“標尺”，所以本身要準確。一般大廠(chǎng)家的產(chǎn)品在出廠(chǎng)前會(huì )經(jīng)過(guò)質(zhì)控，然而一些小公司的產(chǎn)品沒(méi)有完整的質(zhì)控環(huán)節，用戶(hù)如果有條件的話(huà)，最好能自己準備一些標準品，進(jìn)行驗證。
快速檢測發(fā)展的方向
    快速檢測的發(fā)展方向呈現以下幾個(gè)特點(diǎn)。首先，產(chǎn)品和技術(shù)種類(lèi)越來(lái)越多，尤其是禁用藥物，雖然相關(guān)法律法規對禁用藥物的要求比較嚴格，但目前快檢產(chǎn)品種類(lèi)還不能覆蓋全部的禁用獸藥，因此需要進(jìn)一步開(kāi)發(fā)新項目相關(guān)的靈敏度高的抗體，以改善目前存在的問(wèn)題?，F在檢測限達不到要求的會(huì )進(jìn)一步提高檢測限，已經(jīng)有產(chǎn)品的比色法判讀改進(jìn)成消線(xiàn)法判讀等。相信隨著(zhù)技術(shù)的發(fā)展和對其研究的深入，快檢產(chǎn)品的應用匯越來(lái)越多。
    其次是出現了更多的標記材料，如熒光、上轉化、磁珠等，需提醒用戶(hù)的是不要過(guò)度迷信新技術(shù)，滿(mǎn)足檢測需求是最基本的要求，根據自己的需求選擇合適的產(chǎn)品即可。在選擇時(shí)，可依據產(chǎn)品檢測限、穩定性、檢測成本、檢測效率進(jìn)行選擇。目前膠體金的應用較多，大多需求也都能滿(mǎn)足，且技術(shù)成熟，產(chǎn)品穩定性較好，新材料可作為膠體金的補充。
    目前市場(chǎng)上也出現了越來(lái)越多的更靈敏的識別原料，使用較多的是單克隆抗體，其穩定性好，批間差異性小。另外還有適配體、受體等，這些原料在研究中較為常見(jiàn)，但應用中較少。使用的較多的仍然是抗體，所以抗體也是衡量一個(gè)公司的關(guān)鍵，可以說(shuō)是核心技術(shù)。
    今后，快速檢測產(chǎn)品的優(yōu)化還會(huì )從更快速的前處理方案、多合一的檢測方案、自動(dòng)化等方面著(zhù)手，提高產(chǎn)品的檢測效率，解放檢測人員的雙手。