食物過(guò)敏原研究進(jìn)展及我國應如何應對
2018-07-20 15:36:34 來(lái)源: 食品安全導刊
—訪(fǎng)拜發(fā)分析系統銷(xiāo)售(北京)有限公司賀麗麗
□ 梁文文 本刊記者
隨著(zhù)我國食品安全水平的提高,人們不再只關(guān)注農殘、獸殘和添加劑的違規使用等問(wèn)題。食品中的轉基因、過(guò)敏原等問(wèn)題也逐漸引起了人們的重視。德國拜發(fā)很早就開(kāi)始關(guān)注過(guò)敏原的檢測與標識問(wèn)題,其研發(fā)和生產(chǎn)的過(guò)敏原檢測系列試劑盒既保持了德國品牌一貫的高品質(zhì)、高水平特點(diǎn),同時(shí)又因其在國內外的廣泛影響力和信賴(lài)度獲得了國內相關(guān)部門(mén)的信任、好評和推薦。食品過(guò)敏原的危害到底有多大?目前國內外對其規定有哪些?又有哪些行之有效的檢測方法?帶著(zhù)這些問(wèn)題本刊記者采訪(fǎng)了拜發(fā)分析系統銷(xiāo)售(北京)有限公司賀麗麗。記者:為何要對食品中的過(guò)敏原成分進(jìn)行標注?其重要性和緊急性體現在哪里?
賀麗麗:過(guò)敏反應是人類(lèi)常見(jiàn)的自身免疫性疾病。據不完全統計,美國約2%的成人和約5%的兒童患有食品過(guò)敏癥;美國每年發(fā)生約30000例對食物嚴重過(guò)敏的病例,近2000人需要住院治療,其中約有150人死于食品過(guò)敏。而隨著(zhù)信息技術(shù),臨床醫學(xué)等技術(shù)的發(fā)展,這一統計數字還在增長(cháng)中。
過(guò)敏性疾病不僅會(huì )影響到人類(lèi)的生活質(zhì)量,嚴重時(shí)甚至會(huì )危及生命,其已經(jīng)成為各國政府尤其是發(fā)達國家高度關(guān)注的全球性問(wèn)題。對于無(wú)過(guò)敏的人群而言,牛奶、花生、雞蛋、魚(yú)等都是健康美味的食品,然而對于那些有過(guò)敏反應的人來(lái)說(shuō),即使是微克級單位量的污染,也會(huì )是他們的夢(mèng)魘,威脅生命安全。更為可怕的是,截至目前,針對食物過(guò)敏尚無(wú)非常有效的治療手段,唯一可行的辦法就是讓易敏者避開(kāi)那些導致過(guò)敏的食物成分,所以對食物中的過(guò)敏原進(jìn)行標注十分重要。
記者:既然食品中的過(guò)敏原標識對過(guò)敏人群如此重要,那么各國對過(guò)敏原的標識都有哪些法律或規定?
賀麗麗:食品法典委員會(huì )及西方國家很早就開(kāi)始重視食品過(guò)敏原的情況,他們根據區域內的實(shí)際情況制定了一些可以實(shí)施的法規或準則。這些法規及準則對食品過(guò)敏原如何標識及各個(gè)國家認定的檢測方法、檢測標準、限量值等都做了相應規定。如下為國際食品法典委員會(huì )及發(fā)達國家的標識法規及準則等。
國際食品法典委員會(huì )制定的有關(guān)食品致敏原的標識管理法規有CODEX STAN 1-1985《預包裝食品標簽通則》、CODEX STAN 118-1979《針對麩質(zhì)不耐受人群的特殊膳食食品》、CAC/GL 45-2003《重組DNA植物食品安全評估準則》、CAC/GL 68-2008《重組DNA動(dòng)物食品安全評估準則等法規及準則》等。
近年來(lái),針對食物過(guò)敏原,歐盟也發(fā)布了如下法規條例——歐盟指令2003/89/EC 食品配料標識信息、歐盟指令2005/26/EC 食品配料標識的致敏原成分臨時(shí)性豁免清單、歐盟指令2006/142/EC 食品標簽中必須標識的致敏原成分清單、歐盟指令2007/68/EC 特定食品配料必須標識的致敏原成分清單、歐盟指令2009/41/EC 麩質(zhì)不耐受人群適用的食品成分和標簽等。
美國也有相關(guān)的過(guò)敏原標識法規:Public law 108-282-AUG. 2. 2004 食品致敏原標識和消費者保護法、Public Law 111-353-JAN. 4. 2011 食品安全現代化法案、RIN 1513-AB08 紅酒、烈酒和麥芽飲料中主要食品致敏原標識、RIN 0910-ZA26 食品標簽:食品的無(wú)麩質(zhì)標識等。
加拿大、日本、中國及其他一些南美、亞洲等國家都有相關(guān)的食品安全條例來(lái)規范企業(yè)的過(guò)敏原標識及指導企業(yè)生產(chǎn)??傮w而言,發(fā)達國家的食品過(guò)敏原管理有以下特點(diǎn)——強制性要求標識食品中可能含有/不含有的過(guò)敏原信息,對食品過(guò)敏原開(kāi)展實(shí)質(zhì)性標識管理已經(jīng)多年,并且已經(jīng)建立相對完善的食品過(guò)敏原標識管理法規標準體系,針對這些法規標準等,也發(fā)展出多種配套檢測技術(shù)手段,并實(shí)現標準化應用。

賀麗麗:由于各國人民的體質(zhì)和飲食習慣的不同,各國對過(guò)敏原物質(zhì)的標識要求也不盡相同。絕大多數國家都要求標簽中標識8大類(lèi),即麩質(zhì)、魚(yú)類(lèi)、甲殼類(lèi)、花生、大豆、乳、堅果等,二氧化硫也是各個(gè)國家的重點(diǎn)標識對象;但日本不要求標注魚(yú)、大豆及堅果;韓國不要求標注堅果及亞硫酸鹽,卻對蜂王漿、豬肉、桃、番茄等要求標注;中國大陸目前只對8大類(lèi)有標識要求。歐盟除了8大類(lèi)需標識外,對芝麻、芹菜、芥菜、羽扇豆、軟體動(dòng)物等也要求標注。此外,加拿大對芝麻有標注要求,澳大利亞、新西蘭對芝麻及蜂王漿有標注要求。
近年來(lái),我國已經(jīng)意識到食品過(guò)敏原成分標識的重要性,目前我國大陸地區關(guān)于食品過(guò)敏原相關(guān)的法規有GB 7718-2011《預包裝食品標簽通則》、GB/T 23779-2009《預包裝食品中的致敏原成分》、SN/T 4286-2015《出口預包裝食品麩質(zhì)致敏原成分風(fēng)險控制及檢驗指南》、DB11/Z 521-2008《奧運會(huì )食品安全 食品過(guò)敏原標識標注》、DBJ440100/T 28-2009《亞運會(huì )食品安全 食品過(guò)敏原標識標注》等。我國香港地區也有食物及藥物(成分組合及標簽)規例、基因改造食物自愿標簽指引。

圖1 拜發(fā)R-Biopharm集團ELISA過(guò)敏原檢測試劑盒
記者:每年有很多食品安全召回事件都與過(guò)敏原未標識有關(guān),那么每個(gè)國家的召回標準是怎樣的呢?
賀麗麗:各國要求的食品過(guò)敏原標識不盡相同,針對食品過(guò)敏原各國要求的召回標準也不一樣。在大量的食品召回事件中,占比最重的就是因為過(guò)敏原標識不正確而引起的召回。
例如美國《2004年食品過(guò)敏原標識和消費者保護法規》中規定:魚(yú)類(lèi)、甲殼貝類(lèi)、樹(shù)堅果三類(lèi)食品必須標注具體的食品名稱(chēng)。食品過(guò)敏原應標注在成分表之后或附近,標注的大小與成分表相同,或者在成分表的相關(guān)食品過(guò)敏原處用括號標出,例外情況除外。如果違反法規要求,對于未聲明過(guò)敏原的產(chǎn)品,美國FDA可能會(huì )要求產(chǎn)品召回。
中國標準出版社出版的《主要貿易國和地區食品中致敏原標識管理》一書(shū),及中國質(zhì)檢出版社、中國標準出版社聯(lián)合出版的《預包裝食品致敏原標識、檢測和生產(chǎn)控制指南》一書(shū)中都對主要貿易國的食品過(guò)敏原標識法規進(jìn)行了描述,食品企業(yè)可以此為參考。
近年來(lái),我國出口食品因未規范標注過(guò)敏原而被通報或召回的事件屢見(jiàn)不鮮。出口食品生產(chǎn)企業(yè),一定要加強與進(jìn)口商的溝通,了解目的國家或地區對過(guò)敏原種類(lèi)和標注的要求;其次要嚴格審查產(chǎn)品配方和工藝,按要求合理使用食品添加劑,同時(shí)注意可能由同一工藝生產(chǎn)線(xiàn)帶入的過(guò)敏原污染,按要求合理標注。
需要注意的是,部分國家和地區的法規標準中已有對過(guò)敏原物質(zhì)的(參考或檢測)閾值的規定。規定如下:麩質(zhì)(CAC):100mg/kg,20mg/kg;麩質(zhì)(意大利):20mg/kg;亞硫酸鹽(EU):10mg/kg;花生(FDA):5mg/kg。
記者:目前有哪些檢測過(guò)敏原的方法?各方法又有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?
賀麗麗:目前用于過(guò)敏原檢測的方法主要有以下幾種——實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈式反應技術(shù)(RT-PCR)、酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)、膠體金檢測法、高效液相色譜法、聚丙烯酰胺凝膠電泳、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜等。其中,ELISA法、實(shí)時(shí)PCR法、膠體金法這3種方法在實(shí)際應用中較為廣泛。
過(guò)敏原檢測方法如果根據檢測對象可以分為兩類(lèi)。第一類(lèi)為直接檢測過(guò)敏原(蛋白質(zhì))的方法,例如酶聯(lián)免疫吸附測定、膠體金檢測法,此類(lèi)方法為基于蛋白質(zhì)水平的檢測,可直接檢測食品中是否含有引起過(guò)敏的相關(guān)蛋白。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)檢測方法成熟,可以定量檢測,靈敏度高,使用的儀器價(jià)格適中,普及性高,樣品處理方法相對簡(jiǎn)單,耗材成本低廉,對環(huán)境、人員沒(méi)有特殊要求。而膠體金檢測法是定性方法,幾分鐘內就可以通過(guò)肉眼簡(jiǎn)單判定結果,幾乎不需要樣品處理,不需要特定儀器,人員不需要專(zhuān)業(yè)培訓,此種方法適合檢測環(huán)境、生產(chǎn)線(xiàn)等。針對8大類(lèi)過(guò)敏原,以上兩種方法都有成熟的商品化的試劑可以使用,因其簡(jiǎn)單、相對準確、快速、價(jià)格適中等特點(diǎn),廣受食品生產(chǎn)企業(yè)的歡迎。
另外,高效液相色譜法、聚丙烯酰胺凝膠電泳、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜等也可直接檢測過(guò)敏原(蛋白質(zhì)),屬于免疫學(xué)檢測,其原理是基于過(guò)敏原(蛋白質(zhì))的分子結構。但由于目前針對物質(zhì)本身能引起過(guò)敏反應的研究并不是很透徹,加之蛋白質(zhì)結構復雜,配套儀器昂貴,操作步驟繁雜,這3種方法目前尚停留在實(shí)驗室階段。
第二類(lèi)是檢測引起食品過(guò)敏的過(guò)敏原標志性物質(zhì),例如采用實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈式反應技術(shù)檢測食品中是否含有花生基因,從而推斷食品中有可能含有花生過(guò)敏原,此類(lèi)方法一般基于基因水平,屬于分子生物學(xué)檢測。目前基于基因水平的檢測方法較為成熟,可以進(jìn)行定量定性檢測,針對特定物質(zhì)的DNA檢測,其本身的靈敏度高,準確性好。此種方法可以和ELISA方法互補使用,能更好的判定樣品中是否含有過(guò)敏原。針對一些特殊的過(guò)敏原,例如芹菜、芥菜、芝麻、軟體動(dòng)物、甲殼類(lèi)動(dòng)物等,目前尚無(wú)任何相對簡(jiǎn)單的ELISA或其他方法可以直接檢測,實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈式反應技術(shù)可以很好的彌補這個(gè)缺陷。此類(lèi)方法對環(huán)境和人員要求較高,儀器耗材成本也較高,人員要經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓。但該方法不能直接檢測過(guò)敏原,目前主要應用于各檢測機構,作為對企業(yè)自檢的補充。
記者:目前針對過(guò)敏原的檢測方法已有一些研究,貴公司有何解決方案或產(chǎn)品?
賀麗麗:我國已經(jīng)意識到食品過(guò)敏原成分標識的重要性,在2007年國家標準制修訂計劃項目中對數十種食品致敏原成分檢測方法進(jìn)行了推薦性國家標準立項,其中包括PCR及ELISA兩種方法;2008年奧運會(huì )期間也正式開(kāi)展了食品過(guò)敏原檢測和相關(guān)標簽標準的工作。德國拜發(fā)R-Biopharm集團也推出了RIDASCREEN®、RIDA®知名品牌的食品過(guò)敏原檢測試劑盒,包括對食品中部分過(guò)敏原的定量檢測,食品生產(chǎn)線(xiàn)的監控和表面定性檢測,以及基于RT-PCR原理的過(guò)敏原DNA鑒定檢測等,為食品生產(chǎn)企業(yè)、加工企業(yè)和政府相關(guān)監督管理部門(mén)及各類(lèi)實(shí)驗室提供了全面的和多元化的食品過(guò)敏原檢測方案選擇。德國拜發(fā)R-Biopharm集團提供的過(guò)敏原系列檢測試劑盒代表了國際食品過(guò)敏原檢測領(lǐng)域的先進(jìn)水平,是歐盟范圍內唯一經(jīng)過(guò)官方驗證的過(guò)敏原檢測產(chǎn)品,同時(shí)通過(guò)了德國、美國和加拿大等多個(gè)國家的標準,獲得了AOAC國際認證,是國際谷物協(xié)會(huì )、英國國家中央實(shí)驗室認可和推薦的產(chǎn)品。
德國拜發(fā)R-Biopharm集團的檢測試劑盒幾乎囊括了小麥、花生、牛奶、蛋類(lèi)、魚(yú)類(lèi)、堅果、貝殼、大豆等8類(lèi)主要過(guò)敏原食物的檢測,其主要依據ELISA和膠體金檢測法研制而成。
ELISA試劑盒 檢測8大類(lèi)食物中的過(guò)敏原
麩質(zhì)的檢測——小麥、黑麥及大麥中的致敏成分為麩質(zhì),麩質(zhì)由50%的谷蛋白和50%的醇溶谷蛋白組成。過(guò)去,大多數ELISA試劑盒都是基于抗體與小麥中的Ω-醇溶谷蛋白片段反應,不能夠定量檢測大麥或黑麥中的醇溶谷蛋白。德國拜發(fā)R-Biopharm集團針對麩質(zhì)過(guò)敏原檢測的試劑盒主要有兩種,其一為RIDASCREEN®麩質(zhì)系列檢測試劑盒:應用單克隆抗體R5,對小麥、黑麥、大麥中的醇溶谷蛋白進(jìn)行檢測,檢出率達到100%,是歐盟食品法典的強制執行方法和唯一一家符合食品法典(CAC)修訂標準并獲得AOAC認證的商業(yè)試劑盒。其二為RIDASCREEN® Gliadin麩質(zhì)檢測試劑盒:配合全球專(zhuān)利的Cocktail提取液,利用提取液中含有的離液劑破壞醇溶谷蛋白分子的聚合,從而實(shí)現對熱加工食品中全部構型醇溶谷蛋白的提取。此外,德國拜發(fā)R-Biopharm集團獨家研發(fā)的RIDASCREEN® Gliadin competitive試劑盒采用競爭性酶聯(lián)免疫分析法,能夠檢測釀造食品中具有致敏性的醇溶谷蛋白多肽序列,在廣州某知名啤酒事件中,德國拜發(fā)R-Biopharm集團第一時(shí)間幫助國家檢測機構完成了特殊樣品檢測任務(wù)。


牛奶過(guò)敏成分的檢測——牛奶中的蛋白主要由酪蛋白和乳清蛋白組成,β-乳球蛋白是牛奶中最主要的乳清蛋白。巴氏消毒法對該蛋白引起的過(guò)敏反應沒(méi)有任何影響。德國拜發(fā)R-Biopharm集團針對牛奶中兩種主要的過(guò)敏成分研發(fā)了β-乳球蛋白及酪蛋白的檢測試劑盒,同時(shí)還能檢測出奶油面包、嬰兒食品等產(chǎn)品中乳球蛋白及酪蛋白的水解片段。

圖2 RIDA®QUICK過(guò)敏原快速檢測條
為方便各企業(yè)監控生產(chǎn)流程及生產(chǎn)環(huán)境的過(guò)敏原交叉污染情況,德國拜發(fā)R-Biopharm集團專(zhuān)門(mén)為廣大食品生產(chǎn)企業(yè)帶來(lái)了德國先進(jìn)的檢測技術(shù)和產(chǎn)品——RIDA®QUICK過(guò)敏原快速檢測條(如圖2所示),其不但能夠快速準確地檢測食物中的過(guò)敏原成份,還可以用拭子方法對食品生產(chǎn)線(xiàn),如工作臺表面、生產(chǎn)設備進(jìn)行直接的過(guò)敏原監控,同時(shí)可用于防止進(jìn)行過(guò)敏原檢測的實(shí)驗室工作臺、移液器和緩沖液被過(guò)敏原蛋白污染,從而避免檢測中出現異常情況。這一方法可使企業(yè)利用一條生產(chǎn)線(xiàn)連續生產(chǎn)普通食品和“無(wú)過(guò)敏原”食品,極大程度地降低企業(yè)生產(chǎn)成本和人員成本。拭子法使用干燥的過(guò)敏原檢測條在10×10cm的表面進(jìn)行采樣,然后將檢測條浸入含有已經(jīng)稀釋的樣品稀釋緩沖液中,5分鐘后讀取檢測結果,見(jiàn)圖3。該方法無(wú)需任何復雜的儀器和技術(shù)培訓,操作簡(jiǎn)單、快速,結果極易觀(guān)察,已為國內外許多知名企業(yè)廣泛應用。

圖3 拭子法的結果判讀方法
盡管PCR檢測方法需要依賴(lài)相對昂貴的儀器設備實(shí)施檢測,一定程度上局限了這種方法的廣泛使用。但此種方法可以和ELISA方法進(jìn)行互補性檢測,更加明確樣品中是否污染過(guò)敏原。針對某些食品過(guò)敏原,如芹菜、芥菜、芝麻、軟體動(dòng)物、甲殼類(lèi)動(dòng)物等,目前尚無(wú)任何相對簡(jiǎn)單的ELISA等其他方法可以直接檢測,因此德國拜發(fā)R-Biopharm集團推出的相關(guān)PCR檢測試劑盒產(chǎn)品恰好填補了這一空白,進(jìn)一步保證了食品中過(guò)敏原監控和檢測的全面性和可操作性。
其他方法及技術(shù)
此外,德國拜發(fā)R-Biopharm集團還開(kāi)發(fā)了應用高靈敏度和高特異性的酶方法的食品過(guò)敏原檢測試劑盒產(chǎn)品,可檢測二氧化硫、組胺等。該方法也已作為歐洲標準方法20余載。
記者:目前,過(guò)敏原檢測行業(yè)的發(fā)展現狀如何?有哪些努力的空間?
賀麗麗:在發(fā)達國家及一些重視過(guò)敏原的國家及地區,過(guò)敏原檢測方法相對固定,基本以酶聯(lián)免疫吸附測定方法及膠體金檢測方法為主,聚合酶鏈式反應方法為輔,其他方法作為參考或者方法本身的研究輔助。
在中國,目前行業(yè)標準有三類(lèi)方法:SN/T 1961《出口食品過(guò)敏原成分檢測》、SN/T 4419-2016《出口食品常見(jiàn)過(guò)敏原LAMP系列檢測方法》、SN/T 4417-2016《常見(jiàn)食品過(guò)敏原可視芯片檢測方法》。以上3種方法都是以聚合酶鏈式反應為基礎原理的方法,具有高通量和檢測結果準確的優(yōu)點(diǎn)。但聚合酶鏈式反應本身檢測對象是核酸,樣品提取過(guò)程繁瑣,而過(guò)敏原本身是蛋白質(zhì),同時(shí)對環(huán)境、人員、儀器要求較高,出口企業(yè)很少考慮此種方法。
中國的過(guò)敏原標識及檢測行業(yè)還有很多工作要做,例如做一些臨床調查,具體統計具有中國特色的食品過(guò)敏原,然后針對國內內銷(xiāo)、國外進(jìn)口的食品生產(chǎn)企業(yè),根據我國特色的過(guò)敏原規范進(jìn)行適合中國國情的標簽標識。例如強制食品企業(yè)需要檢測哪些過(guò)敏原?如何檢測?是否是國際認可方法?推薦食品企業(yè)需要標識哪些過(guò)敏原?如何正確的標識?
政府針對出口國外的食品生產(chǎn)企業(yè),要加強同企業(yè)的溝通,幫助企業(yè)了解出口對象國的過(guò)敏原檢測、標識情況;針對消費者來(lái)說(shuō),如果食品標簽中標識了過(guò)敏原,也需要教育消費者如何了解標簽中過(guò)敏原的標識,找到適合自己的食品。監管部門(mén)要鑒別市場(chǎng)上目前存在的各種各樣的檢測方法,制定一套標準,既準確有效,又能快速推廣至企業(yè),方便企業(yè)盡快生產(chǎn)出適合特殊消費者的產(chǎn)品。對于我們檢測行業(yè)的人員來(lái)說(shuō),找到一個(gè)準確有效、快速、價(jià)值適中的產(chǎn)品,幫助企業(yè)建立起自己的過(guò)敏原檢測體系也是拜發(fā)義不容辭的義務(wù)。

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