《食品安全導刊》刊號:CN11-5478/R 國際:ISSN1674-0270

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快速檢測片在食品微生物檢測中的應用

2018-05-14 14:05:48 來(lái)源: 食品安全導刊

摘 要:中國人民的生活質(zhì)量在不斷提高,對食品安全問(wèn)題也日趨重視,為了保證食物的食用安全,在食品安全檢查中,應嚴格遵守食品微生物檢測方法,其中使用快速檢測法可以達到有效檢測的目的,提高食品安全檢測的效率,進(jìn)而為人們的身體健康提供保障。本文對快速檢測片在食品微生物檢測方面的應用進(jìn)行了探討,并且與實(shí)際的食品安全檢測工作相結合,提出了一些改善建議。
關(guān)鍵詞:快速檢測片   食品安全   微生物檢測   應用
 
    現如今,大多食品都會(huì )經(jīng)過(guò)生產(chǎn)、加工、運輸等環(huán)節處理,然而無(wú)論是哪個(gè)環(huán)節,都有被微生物污染的可能,如果食品被微生物所污染,那么微生物很可能在食品中大量繁殖,從而導致食品快速腐敗,而人食用這種食物后可能會(huì )出現食物中毒。近年來(lái)環(huán)境污染問(wèn)題日益嚴重,對食品安全也造成了一定的影響,增大了食品微生物對人體健康的威脅。因此需要選用合適的食品檢測方法來(lái)對食物進(jìn)行微生物檢測,使用快速檢測片來(lái)檢測食物中的微生物具備操作簡(jiǎn)單、反應快速以及結果準確等優(yōu)點(diǎn),本文對快速檢測片進(jìn)行了探討。
 
1 快速檢測片在食品微生物檢測中的應用優(yōu)點(diǎn)
    在食品微生物的檢測工作中,快速檢測片主要有如下三大優(yōu)勢:
    第一,快速檢測片在少量食品小樣檢測中的檢測速度較快。因為不需要其他試劑的輔助,所以操作十分簡(jiǎn)便??焖贆z測片需要的檢驗器皿數量及種類(lèi)較少,其消毒以及保存的方式也十分簡(jiǎn)單,在運輸方面同樣有一定優(yōu)勢,并且符合經(jīng)濟性的原則??焖贆z測片對環(huán)境的污染程度較低,沒(méi)有檢測后的廢液或廢渣,其對食物小樣中的微生物檢測工作完成后的清洗工作較少,降低了食品微生物檢測工作量。與其他檢測方法相比,快速檢測片完善了熱瓊脂法在受損細菌中的不足,因此適用于室外檢測工作。
    第二,在食品微生物檢測中使用快速檢測片可以同時(shí)進(jìn)行接種工作和取樣工作,這樣得到的檢測結果更加真實(shí),還可以有效避免因為接種時(shí)間過(guò)長(cháng)而出現細菌繁殖的情況,避免得到誤差較大的檢驗數據。
    第三,其他的食品微生物檢測方法所需時(shí)間較長(cháng),并對檢測溫度有一定的要求,一些基層食品單位無(wú)法滿(mǎn)足這些條件,導致不能得到理想的檢測效果。經(jīng)過(guò)實(shí)際的檢測得到了以下對比數據,例如使用常規法檢測的細菌總數為48,應用檢驗紙片得到的數據在16~18的范圍內,3M測試片檢測得到的總數與常規法相同。在使用常規方法檢測大腸菌群數量時(shí),得到的結果是72~96,檢測紙片的測試結果為16~18,3M測試片的檢驗結果為24。使用常規法對大腸桿菌進(jìn)行檢驗得到的數量為240,檢測紙片的數據為24,3M測試片的數據為48。由以上3個(gè)實(shí)驗數據可知,快速檢測片確實(shí)具備防止食品小樣因為檢測時(shí)間過(guò)長(cháng)而出現細菌大量繁殖的技術(shù)優(yōu)勢,經(jīng)實(shí)際實(shí)驗數據驗證可知,快速檢測法的優(yōu)點(diǎn)屬實(shí)。
 2 在食品微生物檢測中較為常見(jiàn)的測試片
    食品微生物檢測中較為常見(jiàn)的是以濾紙為載體的測試片,濾紙要選用白色、分布密度均勻、無(wú)毒并且吸附能力合理的作為食品微生物檢測的載體,將其裁剪為常規的尺寸(4.0cm×5.0cm),在無(wú)菌的實(shí)驗培養基中加入2,3,5-三苯基氯化四唑(TTC),再將裁剪好的濾紙浸入其中,在這個(gè)過(guò)程中要注意掌握好濾紙在培養基中的吸附量,然后將其干燥處理,處理完成后再將其裝入滅菌過(guò)的塑料口袋中,密封好,為食品微生物的檢測做準備。TTC屬于化學(xué)范疇中的氧化還原指示劑,在與氫結合后成為不溶于水的紅色物質(zhì),在濾紙上的狀態(tài)為紅點(diǎn),紅點(diǎn)的總數即為細菌的數量,但是需要注意的是TTC過(guò)量會(huì )抑制細菌生長(cháng),因此在用量上要控制好,以反應靈敏為原則,同時(shí)不能對細菌的生長(cháng)速度造成影響。一次性的快速檢測紙片在檢測完之后需要進(jìn)行焚燒,因此其檢驗的后續清理工作較為簡(jiǎn)單。將國標檢驗方法與快速檢測片方法進(jìn)行統計學(xué)對比,兩者結果并無(wú)較大差異,但是要注意濾紙的密度較大,而菌類(lèi)如果在其纖維上則無(wú)法用肉眼進(jìn)行判斷,因此微生物的檢驗結果會(huì )比實(shí)際細菌數量少。
3 在食品微生物檢測中所應用的快速檢測方法
    為改善快速檢測片的不足,還需要將其他方法與快速檢測法相結合,由此得到功能完善的快速檢測片。在不同的食品微生物檢測工作中應根據其特征來(lái)選擇相應的快速檢測法,如果檢測目的是要對食品中特征性很強的DNA進(jìn)行復制,則要用到PCR快速檢測法,這種方法可以對DNA進(jìn)行高效復制,還可以得到DNA大小的信息。如果所檢測的食品DNA擁有目的基因,需要在對其特征DNA進(jìn)行復制的同時(shí),利用聚合酶鏈式反應來(lái)檢驗食品中微生物的物種,這樣可以在短時(shí)間內得到微生物的檢驗結果。如今,快速檢測法中的PCR檢測法得到了廣泛應用,并且在不斷的完善。當相關(guān)的檢測單位應用PCR檢測法進(jìn)行檢測時(shí),一般都會(huì )使用BAX系統,這種檢測系統得到多個(gè)國際性權威機構的肯定,因此可靠性較高。根據堿基兩兩相配對的生物原理,核酸探針快速檢測方法是要標記需要檢測的DNA,然后使其在一定的環(huán)境條件下與特定的菌種進(jìn)行核酸序列雜交,由此產(chǎn)生雙鏈,然后再利用得到的雙鏈來(lái)對食品的小樣進(jìn)行檢測。核酸探針式快速檢測方法的優(yōu)勢在于直接、方便,并且其檢測結果準確度較高,因此受到了食品微生物檢測機構的重視。
    熒光抗體快速檢測法屬于免疫學(xué)檢測法的范疇,其原理是應用熒光物來(lái)對抗血清抗體進(jìn)行物理標注,由此可以得到抗抗體。然后使用熒光顯微鏡來(lái)對樣品進(jìn)行觀(guān)察,再與食品樣品中的目的微生物進(jìn)行對比,由其菌種以及抗體的形態(tài)來(lái)判斷食品中微生物的類(lèi)別。免疫學(xué)快速檢測法還包括免疫酶快速檢測法,這種檢測法利用酶來(lái)對抗體進(jìn)行標記,然后再使經(jīng)過(guò)標記的酶與抗原發(fā)生相關(guān)的一系列反應,由此得到較為特殊的抗原化合物組合。這種快速檢測法主要是觀(guān)察有色酶反應的具體情況以及其濃度變化,這樣可以檢測出食品中的抗原和抗體的數量以及分布情況,此類(lèi)快速檢測法使用的技術(shù)為固相免疫酶測定技術(shù)、免疫酶定位技術(shù)和免疫酶沉淀技術(shù),而在檢測過(guò)程中所使用的檢測工具一般為Reveal沙門(mén)氏菌檢測技術(shù)以及Reveal大腸桿菌檢測系統等。除上述兩種免疫學(xué)快速檢測技術(shù)外,還有免疫磁珠快速檢測法,這種快速檢測法主要是由與抗體所連接的磁珠來(lái)對食品小樣培養液中的目的微生物進(jìn)行跟蹤并且捕捉,隨后再將得到的目的菌種放到專(zhuān)業(yè)的選擇性平板上,由技術(shù)人員來(lái)對目的菌種進(jìn)行觀(guān)察,在這種檢測法中,可以應用熒光標記或者酶標記來(lái)對小樣進(jìn)行檢測,再使用聚合酶鏈式反應來(lái)對其進(jìn)行更深層次的檢測處理,免疫磁珠快速檢測法在檢測加工食品以及各類(lèi)動(dòng)物飼料中應用較為廣泛,并且對于大腸桿菌O157和沙門(mén)氏菌的微生物檢測十分有成效。
4 總結
    現階段,食品微生物快速檢測法在不斷完善,其中PCR快速檢測法與免疫學(xué)快速檢測法的應用較為廣泛??焖贆z測片具備操作簡(jiǎn)單、成本低、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn),因此受到了檢測單位的青睞。但是以濾紙為載體的快速檢測片存在濾孔較大、保水性不高、檢測范圍有限、不能給予菌體合適的生長(cháng)環(huán)境等諸多不足之處,因此需要與其他食品微生物檢測方法相結合,由此來(lái)在保證快速檢測法優(yōu)點(diǎn)的前提下對其進(jìn)行改善,拓展其對食品微生物的檢測范圍,從而為食品安全提供保障。
 
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